Thermo Scientific Endonuclease IV (Endo IV) erkennt apurinische bzw. apyrimidinische (AP) Stellen in dsDNA, spaltet die Phosphodiester-Bindung 5' zur Läsion auf und bildet dabei eine Hydroxyl-Gruppe am 3-Terminus (siehe Abbildung 1 in Unterstützungsdaten). Das Enzym kann auch als 3'-Diesterase fungieren, die 3'-Phosphoglycolat oder 3'-Phosphat von den beschädigten Enden der dsDNA freisetzt. Endo IV weist auch eine 3‘→5'-Exonuklease-Aktivität auf. Sie reagiert auf Substraten sensitiv auf Ionenstärke, Metallionen, EDTA und reduzierende Bedingungen. Substrate mit 3'-zurückgesetzten Enden sind bevorzugte Substrate für die 3'→5'-Exonukleaseaktivität.
Das Enzym ist für Mg2+ nicht erforderlich und bei Vorhandensein von EDTA in moderaten Konzentrationen vollständig aktiv.
Anwendungen
• Untersuchungen von DNA-Schäden und -Reparatur • Elektrophorese einzelner Zellen (Kometen-Assay) • Antitumor-Arzneimittelforschung • DNA-Strukturforschung • SNP-Analyse
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