Thermo Scientific dsDNase ist eine speziell entwickelte Garnelen-DNase, die für die schnelle und sichere Entfernung kontaminierender genomischer DNA aus RNA-Proben entwickelt wurde. Diese Endonuklease spaltet Phosphodiesterbindungen in DNA, um Oligonukleotide mit 5'-Phosphat und 3'-Hydroxyltermini zu erhalten. Die hochspezifische Aktivität in Richtung doppelsträngiger DNA sorgt dafür, dass RNA und einsträngige DNA, wie cDNA und Primer, nicht gespalten werden. dsDNase wird durch die Modetat-Wärmebehandlung (55 °C) leicht inaktiviert. Diese Eigenschaften machen dsDNase zu einer ausgezeichneten Wahl für die gDNA-Ausscheidung vor der Reverse Transkription. Sie ermöglicht einen erheblich vereinfachten Arbeitsablauf, der die Genom-DNA-Elimination und die cDNA-Synthese in einem Ein-Röhrchen-Verfahren kombiniert.

Besonderheiten

• Hochspezifischer Abbau doppelsträngiger DNA
• Schnelles 2-minütiges Protokoll zur gDNA-Entfernung vor der Reverse Transkription
• Hitzelabil – irreversibel inaktiviert durch moderate Wärmebehandlung (55 °C)

Anwendungen

• Genomische DNA-Entfernung aus RNA-Proben vor der ersten StrangcDNA-Synthese, RT-PCR und RT-qPCR

Spezifitäten der dsDNAs—dsDNase-Aktivität in Bezug auf doppelsträngige und einsträngige DNA- und RNA-Oligonukleotide wurden gemessen. Relative Aktivitätswerte zeigen an, dass dsDNase in Bezug auf doppelsträngige DNA hochspezifisch ist.

• dsDNA – 100 % relative Aktivität
• ssDNA – < 0,03 % relative Aktivität
• dsRNA – < 0,01 % relative Aktivität
• ssRNA – < 0,01 % relative Aktivität