Thermo Scientific Proteinase K ist eine endolytische Protease mit breitem Spektrum, die für den Verdau von Proteinen in Nukleinsäurepräparaten verwendet wird. Sie baut Proteine sogar in Gegenwart von Detergenzien ab. Proteinase K spaltet Peptidbindungen an den Carboxy-Seiten aliphatischer, aromatischer oder hydrophober Aminosäuren auf. Proteinase K ist als Serinprotease klassifiziert. Das kleinste Peptid, das von diesem Enzym hydrolysiert wird, ist ein Tetrapeptid.

Highlights

• gebrauchsfertige Lösung
• aktiv bei zahlreichen Reaktionsbedingungen

Anwendungen

• Isolierung genomischer DNA aus Mausschwanz
• Isolierung genomischer DNA aus kultivierten Zellen
• Entfernung von DNase und RNase bei der Isolierung von DNA und RNA aus Geweben oder Zelllinien
• Bestimmung der Enzymlokalisierung
• Verbesserung der Klonierungseffizienz von PCR-Produkten

Hinweis

• Die empfohlene Arbeitskonzentration von Proteinase K beträgt 0,05 bis 1 mg/ml. Die Aktivität des Enzyms wird um 0,2 bis 1 % SDS oder um 1 bis 4 M Harnstoff stimuliert
• Ca2+ schützt Proteinase K vor Autolyse, erhöht die thermische Stabilität und verfügt über eine regulatorische Funktion für den Substratbindungsort von Proteinase K
• stabil über einen breiten pH-Bereich: 4,0 bis 12,5, optimaler pH 7,5 bis 8,0
• optimale Aktivität bei 50 bis 55°C
• schnelle Denaturierung des Enzyms bei Temperaturen über 65°C