Thermo Scientific Nativ Taq DNA Polymerase ist eine äußerst thermostabile DNA-Polymerase des thermophilen Bakteriums Thermus aquaticus. Das Enzym katalysiert die 5‘→3‘ DNA-Synthese, hat keine nachweisbare 3‘→5‘ Exonuclease- (Korrektur-)aktivität und besitzt eine geringe 5‘→3‘ Exonucleaseaktivität. Zudem weist die Polymerase Deoxynukleotidyltransferaseaktivität auf, die häufig zusätzliche Adenine an das 3'-Ende von PCR-Produkten anhängt. Native Taq DNA-Polymerase wird für die Amplifikation bakterieller DNA-Sequenzen bevorzugt, die homolog zu den in E. colivorkommenden Sequenzen sind.

Taq DNA-Polymerase (nativ, mit BSA) wird zusammen mit BSA als Stabilisierungsmittel geliefert. Diese Version der Taq DNA-Polymerase ist oft die beste Wahl, wenn DNA-Proben mit geringerer Reinheit, z. B. genomische DNA aus dem Mausschwanz, amplifiziert werden.

Highlights

• thermisch stabil — Halbwertzeit beträgt bei 95°C mehr als 40 min.
• Erzeugt PCR-Produkte mit 3'-dA-Überhängen.
• Lieferung mit zwei Puffern —10X Taq Puffer mit KCl und 10X Taq Puffer mit (NH₄)₂SO₄. Letzteres ermöglicht eine PCR bei einem breiten Bereich von Magnesiumkonzentrationen und verringert unspezifisches Priming.
• Enthält modifizierte Nukleotide (z. B. Biotin-, Digoxigenin-, fluoreszenzmarkierte Nukleotide).

Anwendungen

• Routine-PCR-Amplifikation von DNA-Fragmenten bis zu 5 kb
• DNA-Markierung (siehe Referenzen 1 bis 3)
• Hochdurchsatz-PCR

Hinweis

• Die Fehlerrate der Taq DNA-Polymerase in der PCR liegt bei 2,2 x 10^-5 Fehlern pro nt pro Zyklus. Demnach beträgt die PCR-Genauigkeit 4,5 x 10⁴. Die Genauigkeit ist der Kehrwert der Fehlerrate und zeigt die durchschnittliche Anzahl der korrekten Nukleotide, die vor Auftreten eines Fehlers eingebaut werden.
• Der 10x Taq-Puffer ohne Detergenzien wird für Microarray-Experimente empfohlen.