Thermo Scientific Phusion High-Fidelity DNA-Polymerasen setzen einen neuen Gold-Standard für die Hochleistungs-PCR. Mit einer 50 Mal niedrigeren Fehlerrate als Taq und einer 6 Mal niedrigeren Fehlerrate als Pfu ist Phusion High-Fidelity DNA-Polymerase eine ausgezeichnete Wahl für Klonierungen und andere Anwendungen, bei denen eine hohe Genauigkeit ausschlaggebend ist. Die Phusion DNA-Polymerasen bieten eine zuverlässige Leistung mit kurzen Protokollzeiten, auch in Gegenwart von PCR-Inhibitoren, und erzeugen höhere Ausbeuten mit geringeren Enzymmengen als andere DNA-Polymerasen.

Phusion High-Fidelity PCR Master Mix ist ein praktisches 2X-Gemisch aus Phusion DNA-Polymerase, Nukleotiden und optimiertem Reaktionspuffer einschließlich MgCl₂. Zwei Master-Mix-Rezepturen sind verfügbar: mit HF-Puffer (F-531S und F-531L) oder mit GC-Puffer (F-532S und F-532L). Die Fehlerrate der Phusion DNA-Polymerase in HF-Puffer (4,4 × 10^-7) ist geringer als in GC-Puffer (9,5 × 10^-7). Master Mix mit HF-Puffer sollte deshalb standardmäßig als Master-Mix für High-Fidelity-Amplifikationen eingesetzt werden. An schwierigen oder langen Templates, wie GC-angereicherten, bzw. Templates mit komplexen sekundären Strukturen, kann der GC-Puffer die Leistungsfähigkeit von Phusion DNA-Polymerase verbessern.

Besondere Merkmale

• Hohe Wiedergabetreue (25X Taq)
• Schnelle PCR dank kurzer Extensionszeiten (15 bis 30 s/kb)
• Robuste Leistung, minimale Optimierung erforderlich

Anwendungen

• Amplifikation schwieriger (GC-reicher) Templates
• PCR mit hoher Wiedergabetreue
• Klonierung
• Template-Generierung für die Sequenzierung
• Long-Range-PCR (bis zu 20 kb)
• Mutagenese
• PCR mit hohem Durchsatz

Verwendung der Phusion DNA-Polymerasen
Annealing-Regeln für Phusion DNA-Polymerasen unterscheiden sich von vielen gängigen DNA-Polymerasen (wie Taq DNA-Polymerasen). Optimale Ergebnisse erzielen Sie mit unserem Tm-Rechner unter www.thermofisher.com/tmcalculator.