Dieses Paket enthält Phusion Hot-Start II High-Fidelity DNA-Polymerase (4 x 500 E) und einen dNTP-Mix hoher Qualität (je 10 mM, 2 x 1 ml).

Phusion Hot-Start II High-Fidelity DNA-Polymerase
Thermo Scientific Phusion High-Fidelity DNA-Polymerasen setzen einen hohen Standard für Hochleistungs-PCR. Mit einer 52 Mal niedrigeren Fehlerrate als Taq und einer 6 Mal niedrigeren Fehlerrate als Pfu ist Phusion High-Fidelity DNA-Polymerase eine ausgezeichnete Wahl für Klonierungen und andere Anwendungen, bei denen eine hohe Genauigkeit ausschlaggebend ist. Sie bieten eine zuverlässige Leistung mit kurzen Protokollzeiten, auch in Gegenwart von PCR-Inhibitoren, und erzeugen höhere Erträge mit geringeren Enzymmengen als andere DNA-Polymerasen.

• Hohe Genauigkeit (52X Taq)
• Keine unspezifische Amplifikation und Primer-Abbau während der Reaktionsaufstellung
• Schnelle PCR aufgrund kurzer Extensionszeiten (15 bis 30 s/kb)
• Erhöhte Produktausbeute mit minimalen Enzymmengen

Bei Verwendung von Phusion Hot-Start II High-Fidelity DNA-Polymerase, Die Amplifikation erfolgt ohne die Produktion unspezifischer Produkte aufgrund der Kombination von Phusion DNA-Polymerase und einem reversibel gebundenen, spezifischen Affibody-Ligand, der die DNA-Polymeraseaktivität bei Raumtemperatur hemmt. Der Affibody-Ligand hemmt auch die 3´→5´-Exonuklease-Aktivität der Polymerase und verhindert so den Abbau von Primern und der Template-DNA beim Ansetzen der Reaktion. Bei Temperaturen, die Polymerase-Aktivität fördern, wird der Ligand freigesetzt, was zur vollständigen Aktivierung der Polymerase führt. Phusion Hot-Start II High-Fidelity DNA-Polymerase wird bei hohen Temperaturen sofort reaktiviert, sodass kein separater Aktivierungsschritt in PCR-Protokollen erforderlich ist.

Verwendung der Phusion DNA-Polymerasen
Die Annealing-Regeln für Phusion DNA-Polymerasen unterscheiden sich von vielen gängigen DNA-Polymerasen (wie Taq DNA-Polymerasen). Optimale Ergebnisse erzielen Sie mit unserem Tm-Rechner unter www.thermofisher.com/tmcalculator.

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dNTP-Mix
Thermo Scientific dNTP-Mix enthält vorgemischte wässrige Lösungen von dATP, dCTP, dGTP und dTTP, jeweils mit einer Endkonzentration von 10 mM. Die Nukleotide haben eine Reinheit von mehr als 99 % und sind frei von Nuklease-Aktivitäten sowie menschlicher DNA und E. coli-DNA. Die Mischungen bieten die Möglichkeit, die Anzahl der Pipettierschritte und das Risiko von Fehlern beim Reaktionsaufbau zu reduzieren.

• Mehr als 99 % Reinheit durch HPLC
• Frei von humaner und E. coli-DNA
• Stabile DNA nach mehreren Gefriertauzyklen
• Bis zu 95 % der dNTPs verbleiben nach 7 Wochen bei Raumtemperatur in Triphosphatform
•Bis zu 90 % der dNTPs verbleiben nach 30 PCR-Zyklen in Triphosphatform (1 Minute bei 94 °C; 3 Minuten bei 72 °C)

Für alle molekularbiologischen Anwendungen, einschließlich PCR, Echtzeit-PCR, High Fidelity und Long PCR, LAMP-PCR, cDNA-Synthese, RT-PCR, RDA, MDA, DNA-Markierung und DNA-Sequenzierung.

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