Der Thermo Scientific Lambda DNA/EcoRI+ HindIII Marker wird für die Größenbestimmung linearer doppelsträngiger großer DNA-Fragmente in Agarosegelen empfohlen. Lambda-DNA wird mit dem/den entsprechenden Thermo Scientific Restriktionsenzym(en) vollständig verdaut, dann gereinigt und in Lagerpuffer gelöst. Die DNA-Fragmente enthalten diverse überhängende Enden, je nach Restriktionsenzym, das für die Markiervorbereitung verwendet wird.

Der Lambda DNA/EcoRI+HindIII Marker kann radioaktiv mit T4-Polynukleotidkinase markiert werden. Alternativ kann er im Zuge der Auffüllreaktion mit Klenow-Fragment oder Klenow-Fragment exo- radioaktiv oder nicht radioaktiv markiert werden. (siehe Ressourcen für Protokolle).

Highlights

• Größenbestimmung und ungefähre Quantifizierung großer DNA-Fragmente
• Scharfe Banden
• Lieferung mit Ladefarbstoff für Proben-DNA

Hinweis
Die kohäsiven Enden (die 12nt cos-Stelle der Lambda-DNA) der angezeigten Fragmente können aneinander anbinden und zusätzliche Banden bilden. Diese Fragmente lassen sich trennen, indem sie fünf Minuten lang bei 65 °C erhitzt und dann drei Minuten lang auf Eis abgekühlt werden.

Die kürzesten Fragmente (schräg) sind bei der Standardelektrophorese nicht sichtbar. Die Fragmentlängen werden durch die Computeranalyse der jeweiligen DNA-Sequenzen vorhergesagt.