Células competentes ElectroMAX™ Stbl4™

Las células competentes ElectroMAX™ Stbl4™ están diseñadas específicamente para la clonación de insertos inestables. Puesto que son células electrocompetentes, tienen una de los mayores eficacias de transformación posibles (> 5 × 10⁹ cfu/µg), lo que las hace ideales para generar ADNc y bibliotecas genómicas y para clonar insertos inestables. Estas E. coli electrocompetentes:

• Son ideales para la clonación de ADN inestable: estabilizan la repetición directa y las secuencias retrovirales
• Permiten la clonación eficaz de ADN genómico metilado
• Admiten la detección de color azul/blanco
• Están diseñadas para ofrecer preparaciones de plasma de alto rendimiento para aplicaciones secuencia abajo
• Proporcionan una eficacia de transformación de >5×10⁹ cfu/µg

Propagación de fragmentos grandes e inestables de ADN con células de alta eficacia de transformación
Muchas cepas de células competentes tienen un genotipo recA1, que reduce la recombinación. Sin embargo, hay casos en que el ADN que está intentando clonar todavía es inestable en esas células, quizás debido a la presencia de repeticiones directas o invertidas, o tramos con gran cantidad de GC. Aunque estas secuencias son relativamente comunes en los genomas eucariotas, son raros en E. coli. Por consiguiente, puede que se den reordenamientos cuando estas secuencias se introduzcan en cepas de E. coli estándares.

Uso de las células ElectroMAX™ Stbl4™
Las células de E. coli electrocompetentes ELECTROMAX™ Stbl4™ son un derivado de las células Stbl2™ y son ideales para la clonación de insertos inestables como las secuencias retrovirales, las repeticiones directas y los genes de matrices en tándem. Además, las células ElectroMAX™ Stbl4™ son útiles para la generación de librerías de ADNc usando vectores derivados de plásmidos y son capaces de asumir y mantener grandes plásmidos (por ejemplo, cósmidos de 50 kb y clones de P1 de entre 100–200 kb). Las células Stbl4™ también contienen un episoma F', lo que les permite servir como huésped para el ADN de una sola cadena, como los vectores de clonación M13mp. El marcador lacZΔM15 ofrece complementación α del gen β-galactosidasa de pUC o vectores similares y, por lo tanto, puede utilizarse para la detección de color azul/blanco de las colonias en placas de agar que contengan Xgal o Bluo-gal e isopropil galactosidasa (IPTG). La mutación de mcrA y la deleción de mcrBC-hsdRMS-mrr permiten la clonación de las secuencias genómicas que estén metiladas. Por último, la mutación de endA1 aumenta considerablemente el rendimiento y la calidad.

Genotipo: mcrA Δ(mcrBC-hsdRMS-mrr) recA1 endA1 gyrA96 gal^-thi-1 supE44 λ^-relA1 Δ(lac-proAB)/F' proAB⁺lacI^qZΔM15 Tn10 (Tet^R)