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Minikit de ARN PureLink™
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Minikit de ARN PureLink™

El minikit de ARN PureLink es un kit basado en columnas que se utiliza para aislar ARN total de altaMás información
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Número de catálogoCantidadTipo de producto
12183025Promo Image250 preparacionesMinikit ARN
12183020Promo Image10 preparacionesMinikit ARN
12183018APromo Image50 preparacionesRNA Mini Kit
A2983950 CartridgesRNA Mini Columns
1218302650 CartridgesHomogenizer
Número de catálogo 12183025
Precio (EUR)
1.592,00
Each
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Cantidad:
250 preparaciones
Tipo de producto:
Minikit ARN
Precio (EUR)
1.592,00
Each
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El minikit de ARN PureLink es un kit basado en columnas que se utiliza para aislar ARN total de alta calidad de una amplia variedad de tipos de muestras en 20 minutos con equipos de laboratorio estándar. El kit incluye soluciones de lisis y lavado sin RNasa que protegen el ARN de las RNasas al mismo tiempo que liberan el ARN del ADN, proteínas y otros residuos celulares. El flujo de trabajo de las columnas de centrifugación rápidas es ideal para procesar tamaños de lotes de bajo a medio rendimiento. El diseño avanzado de la minicolumna de ARN PureLink permite una entrada de muestras máxima (200 mg de tejido) y la recuperación de ARN (hasta 1000 µg). Esto significa que los usuarios pueden procesar muestras de tamaño pequeño y grande con el mismo kit de aislamiento de ARN.

• Procesamiento de las entradas de muestras de 5 a 200 mg de tejido animal o vegetal, o de cultivos celulares de 0,5 x 106 a 108 con una columna de centrifugación en 20 minutos
• Aislamiento de más ARN que las minicolumnas de centrifugación de la competencia: hasta 1000 µg de ARN total de una columna
• Uso de ARN aislado en la mayoría de las aplicaciones sin la necesidad de realizar un tratamiento adicional con ADNasa (arrastre mínimo de ADN residual muy bajo)
• Flexible: el tratamiento ADNasa opcional en la columna o después del aislamiento está disponible con el conjunto de ADNasa PureLink para una fácil extracción del ADN residual

La capacidad de unión extragrande permite una rápida purificación de ARN utilizando equipos de laboratorio estándar
El minikit de ARN PureLink proporciona una rápida purificación de ARN total a partir de una amplia gama de tipos de células y tejidos para producir hasta 1000 µg de ARN purificado a partir de una única extracción (véase la figura 1). Se puede obtener ARN total de alta calidad a partir de cantidades preparadas de tamaño pequeño o mediano de material inicial con una cantidad mínima de contaminación de ADN genómico residual. La capacidad de unión extragrande permite que un kit pueda ocuparse de la mayoría de las necesidades de aislamiento de ARN en un protocolo rápido de 20 minutos sin necesidad de instrumentos especiales para el procesamiento de muestras.

Tratamiento de ADNasa fácil y opcional en columna para aplicaciones sensibles
Las columnas del minikit de ARN PureLink son altamente eficaces para aislar ARN total de alta calidad mientras se extrae la mayoría del ADN genómico. En general, la mayoría de las aplicaciones que requieren ARN de tejidos animales o líneas celulares de mamíferos no necesitan un tratamiento adicional con ADNasa. Sin embargo, algunas aplicaciones, como el análisis de expresión génica mediante qRT-PCR sin primers que abarquen intrones o trabajar con muestras de organismos con intrones muy pequeños o sin ellos, pueden requerir una eliminación más completa del ADN contaminante residual. El conjunto de ADNasa PureLink permite una cómoda digestión en columna del ADN durante el protocolo de aislamiento de ARN. Tratar con ADNasa mientras está «en columna» es más fácil y permite una mayor recuperación del ARN que tratar con ADNasa después de que el ARN se haya aislado. El conjunto de ADNasa PureLink también se puede utilizar para eliminar el ADN residual del ARN que se ha purificado previamente. Tanto los flujos de trabajo de purificación «en columna» como posterior al ARN son opciones disponibles con el conjunto de ADNasa PureLink.

Purificación de ARN simplificada y atóxica
El minikit de ARN PureLink utiliza un tampón de lisis de isotiocianato de guanidina sin toxicidad para proteger el ARN durante los pasos del aislamiento. Los reactivos especiales sin RNasa combinados con membranas de sílice sin RNasa certificadas en una configuración de columna única permiten un procedimiento seguro y fácil que normalmente se puede completar en menos de 20 minutos sin necesidad de una extracción peligrosa de fenol/cloroformo, una centrifugación de CsCl o una precipitación de LiCl o alcohol.

Se recomienda utilizar el minikit de ARN PureLink junto con el homogeneizador (n.° de cat. 12183026), diseñado para homogeneizar los lisados de células o tejidos mediante centrifugación, antes de la purificación del ácido nucleico. El homogeneizador es especialmente eficaz para aclarar partículas de tejidos vegetales.

Para los tejidos vegetales ricos en polifenoles o almidón (por ejemplo, agujas de pino o tubérculos de patatas), recomendamos utilizar el reactivo de ARN de plantas PureLink (n.º de cat. 12322012) junto con el minikit de ARN PureLink.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones
Volumen de eluciónDe 30 to 100 μl
Tipo de producto finalARN total
Para utilizar con (aplicación)RT-PCR, qPCR, construcción de bibliotecas de ADNc, NGS, análisis de micromatrices, hibridación blot, Northern Blotting, traslación in vitro, ensayos de protección de nucleasas, etiquetado de ácidos nucleicos
Compatibilidad de alto rendimientoNo compatible con alto rendimiento (manual)
Tipo de productoMinikit ARN
Tiempo de purificación20 min
Cantidad250 preparaciones
BásculaMini
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Cantidad de material de partida5 x 10^6 a 1 x 10^8 células, hasta 200 mg de tejido
ProducciónHasta 350 μg
Isolation TechnologyColumna de centrifugación de sílice
Tipo de muestraCualquier tipo de tejido, cultivo bacteriano, sangre, cultivos celulares, Muestras líquidas (p. ej., suero), planta, homogeneizados de tejidos
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
• Tampón de lisis (500 ml)
• Tampón de lavado I (250 ml)
• Tampón de lavado II (75 ml)
• Agua sin RNasa (75 ml)
• Cartuchos de centrifugación con tubos de recogida (5 × 50 cada uno)
• Tubos de recogida (5 × 50 cada uno)
• Tubos de recuperación (5 × 50 cada uno)

Almacenar a temperatura ambiente.

Preguntas frecuentes

I've isolated RNA using the PureLink RNA Mini Kit, but see inhibition of downstream enzymatic reactions. What could be causing this?

The presence of ethanol or salt in the purified RNA can inhibit downstream enzymatic reactions. Ensure that you are using the correct order of wash buffers in the kit for washing, and that Wash Buffer II is discarded in the flow-through. Place the spin cartridge into the wash tube and centrifuge the spin cartridge at maximum speed for 2-3 minutes to completely dry the cartridge.

I'm seeing RNA degradation after RNA extraction using the PureLink RNA Mini Kit. What happened?

The RNA could have been contaminated with RNase. Ensure that you are using RNase-free equipment and change gloves frequently. Improper handling can also result in RNA degradation. Ensure samples are processed immediately, and that the lysis is performed quickly after adding the lysis buffer. Lastly, tissues rich in RNase (such as rat pancreas) may require the addition of RNase inhibitors or inactivators to protect the RNA from degradation, or a larger volume of lysis buffer.

I'm getting low RNA yield when using the PureLink RNA Mini Kit. What could be the cause of this and what do you suggest I try?

Low RNA yield can occur due to the following:

- Incomplete lysis and homogenization: ensure that 10 µL of 2-mercaptoethanol was added per milliliter of lysis buffer, perform all steps at room temperature, decrease the amount of starting material used, use proper homogenization methods, and/or cut tissue samples into smaller pieces to ensure complete tissue immersion in the lysis buffer.
- Poor quality starting material: use fresh samples and process immediately after collection.
- Ethanol may not have been added to Wash Buffer II.
- Incorrect elution conditions may have been used: Add RNase-free water and incubate for 1 minute before centrifugation, following the recommendations for elution in the manual. You can also perform a second elution step to recover more RNA.

I'm using the PureLink RNA Mini Kit and my RNA spin cartridge is clogged. What should I do?

Incomplete homogenization or dispersal of precipitate after ethanol addition can lead to clogging of the RNA spin cartridge. Clear the homogenate and remove any particulate or viscous material by centrifugation. Completely disperse any precipitate that forms after adding ethanol to the homogenate. Load only the supernatant onto the RNA spin cartridge to avoid clogging.

What are the differences in technology between the PureLink RNA Mini Kit and RiboPure RNA Purification Kits?

The PureLink RNA Mini Kit provides rapid column-based purification of total RNA, without organic lysis (phenol/chloroform). You can obtain up to 1,000 µg of purified RNA from a single extraction. The RiboPure RNA Purification Kits combine a phenol/guanidine thiocyanate solution with a glass-fiber filter purification method.

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