La agarosa Thermo Scientific NeutrAvidin de alta capacidad es una resina de agarosa granulada procedente de proteína NeutrAvidin inmovilizada, una forma modificada de avidina con características excepcionales de unión de la biotina para métodos de purificación por afinidad.
Características de la agarosa NeutrAvidin de alta capacidad:
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Proteína NeutrAvidin: proteína avidina desglicosilada y purificada (60 kDa, pI 6,3),tetramérico con cuatro sitios de unión de biotina por molécula
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Resina de agarosa: el soporte es agarosa granulada al 6 % entrecruzada (CL-6B), la resina más utilizada en métodos de purificación de proteínas por afinidad
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Inerte y estable: la proteína NeutrAvidin se inmoviliza mediante uniones covalentes, sin carga y resistentes a la lixiviación, lo que produce una unión inespecífica y permite múltiples usos sin disminuir el rendimiento
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Alta capacidad: esta variedad de gránulos tiene una densa carga de proteína NeutrAvidin inmovilizada, lo que proporciona una capacidad de unión superior a 8 mg de BSA biotinilada por ml de resina
La agarosa NeutrAvidin de alta capacidad es una forma de avidina especialmente purificada y desglicosilada que se ha inmovilizado covalentemente a alta densidad en agarosa granulada entrecruzada al 6 % de gran calidad. En comparación con la avidina nativa, la proteína NeutrAvidin es más neutra y presenta propiedades de unión mucho más específicas en aplicaciones de unión de biotina. Los gránulos de agarosa tienen propiedades fisicoquímicas que permiten su uso en distintos procedimientos de afinidad en columnas o en lotes. Generalmente, los productos NeutrAvidin funcionan bien o mejor que sus contrapartes de estreptavidina y son menos costosos.
La proteína NeutrAvidin es avidina nativa desglicosilada de clara de huevo. La eliminación del exceso de carbohidratos mediante un proceso exclusivo produce una proteína con un punto isoeléctrico más neutral y menos propiedades de unión inespecífica. Las resinas NeutrAvidin se preparan acoplando covalentemente la proteína utilizando químicos eficientes y estables, resultando en soportes resistentes a la lixiviación y estables a pH 2 - 11. Los productos son una opción excelente para numerosas aplicaciones de purificación por afinidad a pequeña o gran escala en las que intervienen macromoléculas, incluida la separación de moléculas biotiniladas de muestras y la inmunoprecipitación de antígenos utilizando anticuerpos etiquetados con biotina.
Propiedades de la agarosa granulada al 6 % entrecruzada (CL-6B):• Estabilidad pH del soporte: de 2 a 14 (corto plazo); de 3 a 13 (largo plazo)
• Tamaño medio de partícula: de 45 a 165 micrómetros
• Límite de exclusión: de 10 000 a 4 000 000 de daltons
• Caudal volumétrico máximo: aprox. 1 ml/minuto (en una columna de 1 cm de diámetro)
• Velocidad lineal máxima: 30 cm por hora
• Presión máxima: menos de 25 psi (1,5 bar)
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