Kit de optimización de la secreción PichiaPink™

El kit de optimización de secreción PichiaPink™ es un nuevo sistema de expresión de proteínas recombinante basado en la levadura Pichia pastoris. El kit de optimización de la secreción PichiaPink™ ofrece una bioproducción práctica y rentable desde el matraz de agitación hasta la producción de 1000 litros de su proteína recombinante. El kit de optimización de la secreción PichiaPink™ se suministra con nuestras nuevas cepas Pichia, los vectores pPINK-HC y pPINK-LC y las secuencias de señales de secreción para la producción de su proteína.

•   Consiga un kit completo para comenzar con la producción de proteínas en Pichia pastoris.
•   Detecte sus transformantes Pichia rápidamente por selección auxotrófica y por colores.
•   Reduzca la degradación de las proteínas con cepas Pichia pastoris deficientes en proteasas.
•   Optimice la secreción de proteínas con una de 8 secuencias de señales de secreción.

El kit de optimización de la secreción PichiaPink™ se suministra con:
• Kit del vector   PichiaPink™ (N.º cat. A11152)
•   Conjunto de señales de secreción PichiaPink™ (N.º cat. A11155)
•   conjunto de la cepa de expresión PichiaPink™ (N.º cat. A11154)
•   Kit de medios PichiaPink™ (N.º de cat.: A11156)

Una nueva forma de detectar los transformantes Pichia
El kit de optimización de la secreción PichiaPink™ utiliza la adenina auxotrófica para seleccionar los transformantes Pichia. Las cepas de PichiaPink™ tienen el genotipo ade2 y requieren la complementación con el gen ADE2 para crecer sin adenina. El uso de un marcador auxotrófico también facilita el mantenimiento de los transformantes. No se requieren antibióticos para mantener sus transformantes.

Además, puede realizar la detección de los transformantes de Pichia por color. Las cepas PichiaPink™ no transformadas aparecen como colonias rosadas, mientras que las cepas PichiaPink™ transformadas aparecen como colonias blancas (Figura 1).

Nuevos vectores de expresión para Pichia
El kit de optimización de la secreción PichiaPink™ se suministra con el nuevo kit de vectores PichiaPink™. El kit incluye dos vectores, pPINK-LC y pPINK-HC. Los vectores pPINK están creados alrededor del gen ADE2 para complementar las cepas las cepas Pichia con ade2 deficiente. Ambos vectores utilizan el acelerador AOX1 inducido por metanol para expresar su proteína. El pPINK-LC se integra con un número de copia bajo en el genoma de Pichia, mientras que el vector pPINK-HC se integra con un número de copia alto.

Los vectores pPINK-LC y pPINK-HC son compatibles con el conjunto de señales de secreción PichiaPink™. Usando una ligadura de 3 vías, puede agregar 8 secuencias de secreción a su gen. Nota: los vectores pPINK expresan proteínas intracelulares por defecto.

Tanto el kit de vector PichiaPink™ (N.º de referencia A11152) como el conjunto de señales de secreción PichiaPink™ (N.º de referencia A11155) se venden por separado para recargar el kit de optimización de la secreción PichiaPink™.

Mantenga sus proteínas intactas
El kit de optimización de la secreción PichiaPink™ se suministra con el conjunto de cepas de expresión PichiaPink™. Este conjunto contiene las 4 cepas Pichia pastoris para su uso con el sistema de expresión PichiaPink™. Las cuatro cepas tienen el genotipo ade2. Además, 3 cepas incluyen deactivaciones génicas en 2 genes de proteasa. Las cepas con deficiencia de proteasa reducen la necesidad de inhibidores de proteasa al cultivar sus células y mejoran el rendimiento de su proteína. Pruebe una desactivación génica individual de proteasa o la desactivación génica doble de proteasa para identificar el más adecuado para usted.

Puede solicitar el conjunto de cepa de expresión PichiaPink™ (N.º N.º A11154) por separado para recargar el kit de optimización de la secreción PichiaPink™.

Sobres de medios para empezar
El kit de medios PichiaPink™ es un conjunto de prácticos sobres de medios preenvasados para su uso con el kit de optimización de la secreción PichiaPink™. El kit de medios PichiaPink™ contiene los medios necesarios para cultivar cepas de PichiaPink™ a partir de material congelado para obtener cultivos listos para su transformación y selección. Puede solicitar el kit de medios PichiaPink™ (N.º N.º A11156) por separado para recargar el kit de optimización de la secreción PichiaPink™.

¿Por qué elegir el sistema de expresión de levadura PichiaPink™?
El sistema de expresión de levadura PichiaPink™ está basado en la levadura Pichia pastoris. Entre las ventajas de la Pichia pastoris se incluyen un rápido crecimiento, antecedentes genéticos bien definidos, una formulación de medios sencilla y un fácil manejo. Durante más de 30 años, la Pichia pastoris se ha utilizado en laboratorios de todo el mundo para producir cientos de proteínas diferentes de muchas especies, incluida la humana (referencias 1 y 2). El sistema de expresión de levadura PichiaPink™ permite producir proteínas de forma práctica y rentable desde pequeñas a grandes escalas.

Para obtener información sobre cómo obtener una licencia de uso comercial para el sistema de expresión de levadura PichiaPink™, consulte la disponibilidad en outlicensing@lifetech.com.

Para uso exclusivo en investigación. No está indicado para uso terapéutico ni diagnóstico animal o humano.

Enlaces relacionados
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Referencias

1. Cereghino JL, Cregg JM. Heterologous protein expression in the methylotrophic yeast Pichia pastoris. FEMS Microbiol Rev. 2000 Jan;24(1):45-66. [PubMed]
2. Cereghino GP, Cereghino JL, Ilgen C, Cregg JM. Production of recombinant proteins in fermenter cultures of the yeast Pichia pastoris. Curr Opin Biotechnol. 2002 Aug; 13 (4): 329-32. [PubMed]