El kit de la actividad ceruloplasmina (para uso exclusivo en investigación) es un ensayo colorimétrico de actividad diseñado para la detección y cuantificación de la actividad de la ceruloplasmina en muestras de suero y orina.
Este kit completo y listo para usar incluye placas transparentes de 96 pocillos, estándar de ceruloplasmina (200 unidades/ml), sustrato de ceruloplasmina y otros componentes para realizar el ensayo. Para utilizar este kit se necesita un lector de microplacas de 96 pocillos capaz de leer la densidad óptica a 560 nm.
Características de rendimiento• Tipo de ensayo: kit de actividad colorimétrica
• Tipos de muestras: muestras de suero y orina
• Sensibilidad: 3,26 mU/ml
• Intervalo de curva estándar: 31,2 mU/ml–1000 mU/ml
• Reactividad: independiente de la especie
ContextoLa ceruloplasmina (CP) es una enzima oxidasa de cobre múltiple que interviene en la gestión del oxígeno en algunas vías metabólicas de los vertebrados. Tras su descubrimiento en 1948, Holmberg y Laurell purificaron una proteína azul de la fracción a2-globulina del suero humano que posee actividad de oxidasa hacia las diaminas aromáticas y el catecol. Esta proteína se denominó «ceruloplasmina», que literalmente significa «sustancia azul del plasma». Durante la evolución, se han incorporado puntos de cobre especializados para proporcionar una reactividad de transferencia de los electrones de largo alcance y una unión y una activación del oxígeno en las proteínas destinadas a hacer frente a la reactividad del oxígeno en diferentes organismos.
La ceruloplasmina pertenece a la familia de oxidasas de cobre múltiple que se encuentran entre las pocas enzimas capaces de unir moléculas de oxígeno para llevar a cabo su reducción completa en agua. La ceruloplasmina contiene un 95 % de cobre en suero. La ceruloplasmina que se encuentra en el suero se expresa en el hígado, pero también en el cerebro, el pulmón, el bazo y los testículos. Este ensayo está validado para usarse en muestras de suero y orina. Las ceruloplasmina son enzimas antiguas que, habitualmente, se comportan de manera similar frente al sustrato colorimétrico. Este ensayo se emplea para medir la actividad de la ceruloplasmina a partir de una amplia gama de fuentes.
Principio del ensayoEl kit de actividad de la ceruloplasmina está diseñado para medir cuantitativamente la actividad de la ceruloplasmina en muestras de suero y orina diluidas. Se proporciona un estándar de ceruloplasmina humano para generar una curva estándar para el ensayo; todas las muestras deben leerse en la curva estándar. Las muestras se diluyen en el tampón de ensayo suministrado y se añaden a los pocillos de una placa transparente de media área. Se añade el sustrato de ceruloplasmina reconstituido y la placa se incuba a 30 °C durante 60 minutos. La ceruloplasmina de los estándares y las muestras reacciona con el sustrato y produce un producto coloreado. La densidad óptica se lee a 560 nm. El aumento de los niveles de ceruloplasmina en las muestras provoca un aumento del producto fucsia (rosa-morado).
Definición de la unidad de ceruloplasminaLa actividad de la ceruloplasmina se basa en la determinación publicada por G. Curzon y L. Vallet, Biochem. J., 1960, 74:279-287. Gracias a nuestros reactivos y tiempos de incubación optimizados, la densidad óptica generada por 1 U/ml de ceruloplasmina es sustancialmente superior al 0,1 de diámetro exterior.
Enlaces relacionadosMás información sobre los kits ELISAMás información sobre otros inmunoensayosPara uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.