CellSensor™ NFAT-bla CHO-K1 Cell Line

La superfamilia de receptores acoplados a proteínas G (GPCR) está formada por unos 600-1000 miembros y es la mayor clase conocida de dianas moleculares con valor terapéutico probado. Los GPCR son fundamentales en la transmisión de una amplia gama de mensajes químicos desde el entorno extracelular hasta el interior de la célula. Los GPCR están implicados en una amplia gama de trastornos, como las alergias, la disfunción cardiovascular, la depresión, la obesidad, el cáncer, el dolor, la diabetes y diversos trastornos del sistema nervioso central. La señalización de los GPCR está mediada por proteínas G triméricas que contienen subunidades α, β y γ, y pueden clasificarse en clases de señalización basadas en la composición de las subunidades. Las proteínas G alfa, G alfa s y G alfa i/o median en la señalización intracelular mediante la activación de vías de señalización que conducen a puntos finales fisiológicos distintos. La activación de los receptores acoplados G alfa s y G alfa i/o conduce a la estimulación o inhibición de la adenilato ciclasa, respectivamente; la activación de los receptores acoplados G alfa q resulta en la estimulación de la fosfolipasa C. La señalización de los GPCR a través de estas vías distintas puede controlarse mediante la activación de elementos de respuesta transcripcional específicos situados antes de un gen reportero. Invitrogen ha desarrollado las líneas de células GeneBLAzer™ Master que emplean el sistema reportero de la betalactamasa. Se puede utilizar para el cribaje tanto de agonistas como de antagonistas de los GPCR que se acoplan a cada una de las vías de señalización anteriores. Estos ensayos basados en células utilizan un sustrato fluorescente permeable a la membrana (CCF4-AM o CCF2-AM), lo que permite una lectura radiométrica que reduce los errores debidos a la variabilidad de las muestras, conduce a excelentes valores del factor Z y permite la miniaturización de los ensayos. Las líneas de células GeneBLAzer™ Master con elementos de respuesta NFAT o CRE están disponibles en los antecedentes celulares Jurkat, CHO-K1 o FreeStyle™ 293F (seis líneas de células en total) para el desarrollo de ensayos en formato de células en suspensión o adherentes. Se diseñan líneas de células estables que emplean un elemento de respuesta NFAT antes del gen de la betalactamasa para el estudio de los receptores acoplados a Gq. Las líneas de células estables que emplean el cAMP Response Element (CRE) antes del gen de la betalactamasa están diseñadas para el estudio de receptores acoplados a _GS. Las células 293F FreeStyle™ son células HEK 293 que se han adaptado para crecer en suspensión en medios sin suero. Alternativamente, estas células se pueden cultivar en presencia de suero para su uso en el formato adherente. Clientes académicos y sin fines lucrativos, infórmense de nuestros precios especiales.