Le kit OptiCHO™ Express est conçu pour une croissance et une transfection efficaces des cellules DG44 ovariennes de hamster (CHO) déficientes en dihydrofolate réductase (DHFR^-) dans une culture en suspension.Le kit fournit un protocole de flux de travaux complet ainsi que les composants nécessaires pour une transfection efficace des cellules DHFR^- DG44 dans un environnement sans sérum et un développement de lignées cellulaires stables ultérieur, notamment :
• Vecteur pOptiVEC™-TOPO™ : vecteur de clonage bicistronique contenant un gène DHFR pour un développement de lignées cellulaires stables dans les cellules CHO-DG44 (Figure 1) ; le vecteur est adapté à TOPO™ et permet le clonage d’un produit PCR contenant votre gène d’intérêt avec une efficacité de > 85 %
• Réagent de transfection FreeStyle™ MAX : un réactif de transfection sans origine animale offrant une grande efficacité de transfection et des résultats uniformes
• Milieu CD OptiCHO™ : un milieu chimiquement défini et exempt de protéines (sans hypoxanthine ni thymidine) spécifiquement conçu pour la culture cellulaire en suspension à haute densité des cellules CHO-DG44 recombinantes et le rendement protéique sécrété
• Milieu CD DG44 : un milieu défini chimiquement, exempt de protéines supplémenté par de l’hypoxanthine et de la thymidine pour favoriser une croissance optimale des cellules DG44 dans les cultures en suspension
• Cellules DG44 : préadaptées au milieu CD DG44 et sélectionnées pour une croissance cellulaire et une efficacité de transfection supérieures

En outre, le kit OptiCHO™ Express fournit le SFM GIBCO™ OptiPRO™ pour une meilleure formation du complexe ADN-lipides, L-glutamine (fournie séparément pour une stabilité accrue des milieux) et Pluronic™ F-68 pour contrôler les forces de cisaillement dans les cultures en suspension.

Stockage :
Conserver le Pluronic™ F-68 entre 15°C et 30°C.Conserver le milieu CD DG44, le SFM OptiPRO™, le milieu CD OptiCHO™ et le réactif de transfection FreeStyle™ MAX entre 2°C et 8°C dans l’obscurité.Conserver la L-glutamine, le vecteur pOptiVEC™-TOPO™, l’amorce de séquençage sens CMV et l’amorce de séquençage antisens EMCV IRES entre -5°C et -20°C.Stockez les cellules E. coli One Shot™ TOP10 chimiquement compétentes à -80°CConserver les cellules DG44 dans de l’azote liquide.