Ce kit de purification par centrifugation GST Thermo Scientific Pierce contient des colonnes de centrifugation du glutathion et des composants de tampon pour offrir un format rapide et facile à utiliser pour purifier les protéines hybrides GST à partir de lysats cellulaires.

Caractéristiques de l’agarose-glutathion :

• Haute capacité : fixe au moins 40 mg de protéine recombinante “tagguée” GST par millilitre de résine
• Rendement élevé et grande pureté : purification régulière d’au moins 10 mg de protéine marquée au GST par millilitre de résine d’une pureté supérieure à 90 %
• Économique : prix avantageux pour une résine réutilisable au moins 5 fois sans perte de sa capacité de fixation ni de ses performances de purification
• Polyvalence : fonctionne bien pour la purification de protéines hybrides “taguées” au GST provenant de lysats bactériens ou pour une utilisation avec des protéines pré-purifiées “taguées” au GST afin d’extraire les interactions de protéines
• Compatible : utilisation et efficacité validées avec les réactifs de lyse cellulaire Thermo Scientific Pierce à des fins d’extraction et de purification à partir de cultures de cellules de mammifères ou de bactéries

Le glutathion est immobilisé par son sulfhydryle central sur une résine d’agarose réticulée à 6 %. La purification de protéines hybrides “taguées” au GST avec du glutathion (GSH) sur des billes d’agarose est bien documentée et fournit une purification par affinité en une étape et d’une pureté élevée. Que ce soit pour purifier de grandes quantités de protéine recombinante de lysats d’E. Coli ou pour analyser des interactions de protéines impliquant des protéines appâts “taguées” au GST, la résine de glutathion-agarose convient parfaitement à la tâche.

L’agarose-glutathion Thermo Scientific Pierce est également proposée en trois volumes de suspension épaisse de résine, en kits complets de purification, deux tailles de cartouches de chromatographie prêtes pour le système FPLC et des plaques de filtration à 96 puits pour des besoins de rendement importants.

L’agarose-glutathion Pierce permet de purifier avec une grande efficacité des taux élevés de protéines hybrides surexprimées et “taguées” au GST à partir de lysats bactériens, tels que celles obtenues avec les réactifs Thermo Scientific BPER pour l’extraction des protéines bactériennes.

La résine offre des résultats performants pour la fixation par lots et les procédures basées sur des colonnes de centrifugation à de nombreuses échelles. Ses performances sont comparables ou supérieures à celles des résines GSH appréciées d’autres fabricants.

La résine glutathion-agarose Pierce est un support de haute qualité, stable et résistant. Les tests confirment l’absence de toute dégradation des performances de la résine après au moins cinq utilisations consécutives. Ces données ont indiqué que la résine était hautement résistante à la dégradation structurelle ou au lessivage de ligands lors d’une utilisation normale.

L’expression et la purification des protéines recombinantes sont essentielles aux études de régulation, structure et fonction des protéines. La majorité des protéines recombinantes sont exprimées sous forme de fusion avec de courts “tags” d’affinité ou de petites protéines, comme le glutathion S-transférase (GST). Cette protéine se lie principalement au glutathion réduit (GSH) dans des conditions quasineutres et non dénaturantes (par exemple tampon Tris). La protéine fixée peut être facilement dissociée (éluée) par déplacement compétitif à l’aide d’un tampon contenant du GSH réduit libre (glutathion oxydé ; le GSSH n’est pas efficace à cet effet). Lorsque des protéines d’intérêt sont exprimées sous forme de fusion avec le GST et que du glutathion est immobilisé sur un support solide, ce système de substrat protéique permet la purification par affinité des protéines recombinantes et de réaliser diverses autres expériences avec ces protéines.

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Agarose-glutathion Pierce™
Colonnes de centrifugation du glutathion Pierce™, 1 ml