Le kit de biotinylation Thermo Scientific EZ-Link Sulfo NHS-SS contient suffisamment de réactifs pour 10 réactions de biotinylation (par exemple, 1–10 mg d’anticorps par réaction). L’EZ-Link Sulfo-NHS-SS-Biotine incluse dans le kit est un réactif de biotinylation par ester de NHS hydrosoluble, dont le bras espaceur comprend une liaison disulfure clivable pour le marquage réversible des protéines et des amines primaires de surface cellulaire.

Caractéristiques d’EZ-Link Sulfo-NHS-SS-Biotine :

• Marquage des protéines : anticorps biotinylés pour faciliter l’immobilisation, la purification ou la détection
• Marquage des surfaces cellulaires : assure uniquement la biotinylation des protéines de surface de cellules entières car le réactif chargé négativement ne traverse pas les membranes cellulaires
• Réactif aux amines : réagit avec les amines primaires (-NH2), telles que les chaînes latérales de lysine ou les terminaisons aminées des polypeptides
• Clivable : la liaison disulfure dans le bras espaceur permet de retirer le marquage biotine à l’aide d’agents réducteurs tels que le DTT ; seul un petit groupe sulfhydryle reste attaché à la molécule
• Soluble : le groupe sulfo-NHS chargé augmente la solubilité de l’eau du réactif par rapport aux composés d’ester de NHS ordinaires
• Longueur moyenne : le bras espaceur (longueur totale ajoutée à la cible) fait 24,3 angströms ; il comporte le groupe acide valérique de la biotine native étendu par une chaîne de 7 atomes

La Sulfo-NHS-SS-Biotine est un réactif de biotinylation clivable par thiol, qui réagit aux amines et contient un bras espaceur étendu pour réduire les obstacles stériques associés à la liaison à l’avidine. Ce réactif est hydrosoluble, et permet d’effectuer une biotinylation en l’absence de solvants organiques tels que le DMSO ou le DMF pour les applications qui ne tolèrent pas les solvants ou qui sont compliquées par leur inclusion. Le composé est particulièrement utile pour le marquage et la purification des protéines de surface cellulaire, car (a) son groupe sulfonate l’empêche de traverser les membranes cellulaires et (b) son bras espaceur clivable permet de libérer les protéines initialement biotinylées des colonnes d’affinité de streptavidine.

Nous fabriquons des réactifs de biotine pour garantir l’intégrité, la cohérence et les performances globales les plus élevées possibles pour les applications de recherche prévues.

Les esters N-Hydroxysulfosuccinimide (NHS) de la biotine sont les réactifs de biotinylation les plus populaires. Les biotines activées par NHS réagissent efficacement avec les groupes amines primaires (-NH2) des tampons alcalins pour former des liaisons amides stables. Les protéines (par ex., anticorps) possèdent plusieurs amines primaires qui sont disponibles sous forme de cibles pour le marquage, notamment la chaîne latérale des résidus de lysine (K) et les extrémités N-terminale de chaque polypeptide.

Grande variété de biotines Les réactifs d’ester NHS diffèrent en longueur, solubilité, perméabilité cellulaire et clivabilité. Les réactifs NHS-biotine non sulfonatés sont perméables aux cellules, mais doivent être dissous dans un solvant organique comme le DMSO ou le DMF. Les sulfo-NHS biotine (et ceux avec les espaceurs pégylés) sont directement solubles dans l’eau mais pas perméables aux membranes. Les variétés contenant des ponts disulfures peuvent être clivées à l’aide d’agents de réduction ; il est alors possible de déconnecter le groupe biotine de la protéine marquée.

Produits associés
Sulfo-NHS-SS-Biotine EZ-Link™
Kit de biotinylation EZ-Link™ Micro Sulfo-NHS-SS