Le kit de coloration à l’argent Thermo Scientific Pierce détecte les protéines électrophorées dans des gels de polyacrylamide 1D et 2D en utilisant de l’argent métallique pour produire des variations de couleur qui facilitent la différenciation des bandes et des taches de protéines.

Caractéristiques du kit de coloration à l’argent :

• Personnalisable : le kit consiste en un ensemble de réactifs qui permet une formulation personnalisée de réactifs de travail et de protocoles de coloration pour des formats de gel particuliers et des applications de coloration à l’argent
• Sensible : détecte de nombreuses protéines à 0,1 ng par millimètre carré dans des gels d’épaisseur standard
• Large détectabilité des protéines : colore une gamme plus large de types de protéines que les colorations à l’argent monochromatiques (les protéines qui ne lient pas l’argent sont révélées par des bandes ou des taches jaunes)
• Différentiation de la couleur : les protéines séparées par un gel et les macromolécules contenant des polypeptides se colorent en cinq couleurs de base : noir, bleu, marron, rouge et jaune
• Résolution de profilage : la détection multicolore de l’ADN, des lipides et des polysaccharides, en plus des protéines typiques, fournit des points de repère supplémentaires pour faciliter le profilage de gel 2D

Le kit de coloration à l’argent contient quatre réactifs et un protocole flexible pour la coloration des protéines dans les gels d’électrophorèse 1D et 2D. La méthode nécessite plus de temps que les colorations argentées monochromatiques, mais offre une plus grande flexibilité pour adapter la concentration des solutions de travail afin d’obtenir une coloration efficace avec différents types de gel et épaisseurs et cibles protéiques inhabituelles. Les protéines colorent sous forme de bandes ou de taches noires, bleues, brunes, rouges ou jaunes selon une combinaison de charge spécifique et d’autres caractéristiques. Une fois que les résultats sont connus pour une protéine d’intérêt particulier, ces légères différences de couleur permettent une identification facile des bandes et des taches.

Inclut :
• Quatre solutions de réactifs (500 ml chacune) : argent, base réductrice, aldéhyde réducteur et base stabilisatrice

Kit de coloration à l’argent ultrasensible et polyvalent pour colorer des protéines traitées par électrophorèse dans des gels de polyacrylamide 1D et 2D. Les bandes contenant moins de 1 ng de protéines sont détectables avec cette coloration à l’argent. Les protéines marquent dans des couleurs reproductibles distinctes visibles sur fond ambré. Les acides nucléiques, comme dans les produits de la PCR, ayant subi une électrophorèse sur gel de polyacrylamide peuvent également être colorés avec ce kit.

Plusieurs méthodes de coloration à l’argent légèrement différentes ont été mises au point au début des années 80. Toutes les méthodes dépendent de la cinétique de l’imprégnation, de la réduction des ions d’argent en argent élémentaire et de sa complexation aux sites de nucléation des protéines dans une matrice de gel poreuse. Le kit de coloration à l’argent utilise une solution faible en acide de nitrate d’argent pour l’imprégnation de gel, suivie du développement dans du formaldéhyde à pH alcalin. Après incubation dans la solution de stabilisation du travail de base, le nitrate d’argent et le formaldéhyde réagissent ou sont diffusés à partir du gel.

Lorsqu’un gel coloré est observé sur une source lumineuse blanche, plusieurs couleurs distinctes peuvent être identifiées. Cinq couleurs de base sont visibles dans les échantillons protéiques avec la coloration couleur argent : le noir, le bleu, le marron, le rouge et le jaune. Les différences de couleur correspondent aux différences dans la composition des acides aminés protéiques, mais il est impossible de prédire de façon plus précise. Les modèles de couleur sont reproductibles pour un échantillon, une durée et une température de coloration donnés. Ils servent à distinguer le chevauchement des protéines et les autres subtilités dans les systèmes 2D.

Indépendamment de la taille et de l’épaisseur du gel, le kit de coloration à l’argent est bien caractérisé et pris en charge par cette procédure complète qui permet d’obtenir une excellente coloration pour des électrophorèses courantes et spéciales impliquant des gels de polyacrylamide.