Topoisomerase I
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Topoisomerase I

La topoisomérase I (enzyme de relaxation d’ADN) catalyse l’élimination des tours superhélicoïdaux de l’ADN fermé de façon covalente par uneAfficher plus
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La topoisomérase I (enzyme de relaxation d’ADN) catalyse l’élimination des tours superhélicoïdaux de l’ADN fermé de façon covalente par une rupture transitoire et la réintégration des liaisons phosphodiesters. La topoisomérase I est active en présence d’EDTA.

Applications : Relaxation de l’ADN surenroulé négativement et positivement (1). Production de topoisomères d’ADN (2).

Source : Purifiée à partir du thymus de veau.

Tests de performance et de qualité : Dosages d’endodésoxyribonucléase, d’exodésoxyribonucléase 3´ et 5´ et de phosphatase ; conversion d’ADN surenroulé en ADN relâché.

Définition de l’unité : Une unité catalyse la conversion de 0,5 µg d’ADN Φ X174 RF superhélicoïdal à un état relâché en 30 minutes à 37°C.

Conditions de réaction de l’unité : Tris-HCl 50 mM (pH 7,5), KCl 50 mM, MgCl2 10 mM, EDTA 0,1 mM, DTT 0,5 mM, BSA 30 µg/ml, ADN Φ X174 RF 0,5 µg
et enzyme dans 50 µl pendant 30 minutes à 37°C.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Type de produitTopoisomérase I
Quantité500 U
Conditions d’expéditionGlace humide
EnzymesTopoisomérase
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Conserver au congélateur (-5 à -30°C).

Foire aux questions (FAQ)

What are the applications and recommended protocols for Topoisomerase I?

Topoisomerase I has two general applications: to relax supercoiled DNA, and to generate samples with defined superhelical density. Generating samples with defined superhelical density is described in Analytical Biochemistry, v.122, p. 253, by Singleton and Wells (1982).

For relaxing supercoiled DNA, use the following protocol:

1. Add 0.5 µg supercoiled PhiX 174 DNA, 50 mM TrisHCl (pH 7.5), 50 mM KCl, 10 mM MgCl2, 0.5 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 30 µg/mL BSA, and 1 unit Topoisomerase I to a final volume of 50 µL.
2. Incubate 30 mins at 37 degrees C.
3. Analyze the treated samples on a 1% agarose gel that does not contain ethidium bromide. Stain with ethidium bromide after electrophoresis is complete.

Do you offer a pre-made buffer for use with Topoisomerase I (Cat. No. 38042024)?

No, we do not offer a pre-made buffer for use with this product.

When editing a cycle on the Procise System, I can readily delete a step, but cannot seem to insert a function into the cycle. What am I doing wrong?

When you edit a flask cycle, be sure to highlight a flask function in order to insert it. Similarly, when editing a cartridge cycle, highlight a cartridge function in order to insert it.

Documentation et téléchargements

Certificats

Safety Data Sheets

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