La BSA Imject Thermo Scientific dans le PBS est une protéine porteuse d’albumine sérique bovine purifiée qui permet la préparation simple d’immunogènes efficaces avec des peptides antigéniques contenant des amines ou des carboxyles.

La BSA est une protéine porteuse immunogène appréciée, utilisée pour la préparation de peptides antigéniques pour l’immunisation et la production d’anticorps. Les préparations de BSA dans un tampon phosphate sont prêtes pour la conjugaison des protéines porteuses d’haptènes au moyen du réticulant glutaraldéhyde ou ester (NHS) réactif aux amines.

Caractéristiques de la BSA Imject dans du PBS :

• Conjugaison à haut rendement : chaque molécule contient 59 résidus lysine, dont 30 à 35 possèdent des amines primaires capables de réagir à un réactif de conjugaison
• Qualité garantie : la BSA purifiée (fraction V) est disponible lyophilisée et stabilisée dans un tampon PBS ou MES, prête à être utilisée dans des méthodes de réticulation à base de glutaraldéhyde, d’ester (NHS) ou d’EDC
• Solubilité compatible : de nombreux groupes carboxyles participent à la charge négative nette (pI 5,1) de la BSA et à sa grande solubilité, ce qui permet de l’utiliser dans un large éventail de conditions de conjugaison
• Immunogène : à 67 kDa, la BSA est suffisamment grosse pour fonctionner en tant qu’immunogène primaire ou en tant que protéine porteuse sans importance pour la détection des anticorps et les immunodosages après l’utilisation de la KLH comme protéine porteuse pour générer la réponse immunitaire contre l’haptène

Les protéines porteuses sont de grosses molécules complexes capables de stimuler une réponse immunitaire lors d’une injection. Une bonne production d’anticorps spécifiques de petits antigènes (comme les peptides ou les composés pharmaceutiques) nécessite la conjugaison covalente de ces haptènes à une molécule plus grosse et plus complexe (généralement une protéine) pour les rendre immunogènes. Les protéines porteuses sont choisies sur la base de leur immunogénicité et de leur solubilité, ainsi que sur la possibilité d’obtenir une conjugaison appropriée de protéines porteuses d’haptènes. La BSA Imject est très soluble dans des tampons aqueux et contient de nombreuses amines primaires et des groupes carboxyles pouvant être ciblés dans le cadre d’une conjugaison avec le glutaraldéhyde, les esters NHS, l’EDC et autres réactifs de réticulation. La BSA Imject est purifiée et lyophilisée dans des tampons qui en optimisent la stabilité et la solubilité dans le cadre d’une conjugaison avec des haptènes.

L’albumine sérique bovine (BSA) est une protéine pratique pour une grande variété d’utilisations en laboratoire en raison de sa grande stabilité et de sa haute solubilité, comme la plupart des protéines plasmatiques abondantes. En outre, la protéine 67 kDa est suffisamment grande et complexe pour être entièrement immunogène. Par conséquent, la BSA est une protéine porteuse couramment utilisée pour la conjugaison avec des haptènes et d’autres antigènes faibles en vue de renforcer leur immunogénicité à des fins de production d’anticorps. Elle est également une protéine porteuse d’haptènes indépendante pour les techniques faisant appel à des microplaques et autres techniques de dosage nécessaires au dépistage des anticorps produits à l’aide de la KLH ou d’une autre protéine porteuse plus immunogène.

L’agent de réticulation carbodiimide EDC conjugue des haptènes contenant des carboxyles (par exemple, le C-terminal des peptides antigéniques) avec la protéine porteuse BSA. Cette méthode de préparation immunogène est idéale pour les peptides antigéniques avec peu ou pas de résidus d’acide aspartique et glutamique (carboxylates) et de résidus lysine (amines primaires) au sein de la portion centrale de la séquence primaire. Les peptides contenant des carboxylates et des amines, la conjugaison d’EDC provoque une polymérisation variée et une orientation aléatoire de ces polymères dans leur liaison à la protéine porteuse. Généralement, cela se traduit par le chargement d’un taux élevé d’antigènes sur la protéine porteuse ainsi que par une présentation selon toutes les orientations possibles pour la production d’anticorps. Cependant, d’importants épitopes (souhaités) au sein de la séquence du peptide antigénique peuvent être bloqués par la conjugaison médiée par l’EDC si ces régions contiennent des amines primaires (résidus lysine) ou des carboxylates (résidus d’acides aspartiques et glutamiques). Dans ces cas, utilisez soit un réticulateur réactif à l’amine homobifonctionnel avec la BSA purifiée dans un tampon phosphate, soit synthétisez le peptide avec une cystéine terminale unique et utilisez un kit avec la BSA activée par maléimide pour préparer le conjugué protéique porteur.

Plus de données sur les produits
• Données sur l’activation des protéines portatives et la conjugaison pour la préparation d’immunogènes

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BSA Imject™ (dans un tampon MES)
Kit de centrifugation de la BSA Imject™ EDC