La phosphine-PEG3-biotine EZ-Link Pierce Thermo Scientific est un réactif de biotinylation pour le marquage des molécules contenant de l’azoture, qui permet la détection basée sur la biotine et la purification par affinité des molécules via des stratégies de ligature Staudinger.

Caractéristiques de la phosphine-PEG3-biotine EZ-Link :

• Soluble : se dissout facilement dans des solvants miscibles à l’eau (par exemple, DMSO) pour une dilution ultérieure dans des mélanges de réactions aqueuses avec des lysats cellulaires et d’autres échantillons biologiques
• Compatible : la chimie de la réaction se produit efficacement dans des conditions de tampon simples ; ne nécessite aucun réactif accessoire tel que le cuivre ou les agents réducteurs
• Chimiosélectivité : le groupe réactif de la phosphine est spécifique dans les échantillons biologiques pour les molécules “taguées” par un azoture, garantissant que la biotinylation est spécifique
• Espaceur de PEG : le bras espaceur de polyéthylèneglycol aide à maintenir la solubilité des molécules marquées et diminue l’encombrement stérique pour la liaison par affinité avec l’avidine, la streptavidine ou la protéine NeutrAvidin

Ainsi, lorsqu’elle est utilisée en association avec des stratégies de marquage des azotures, ce composé permet la détection ou la purification par affinité des interactions protéiques et des modifications post-translationnelles à l’aide de sondes de streptavidine ou de résines d’agarose de streptavidine. Le groupe phosphine de phosphine-PEG3-biotine se conjugue à des groupes azotures par le mécanisme de réaction de Staudinger. Les groupes azotures peuvent être introduits dans des protéines ou d’autres cibles cellulaires par marquage in vivo avec des dérivés “taguées” à l’azoture de blocs de construction métaboliques naturels. Comme ni les phosphines ni les azotures ne sont présents dans les systèmes biologiques, ils comprennent une paire de ligature chimiosélective (mutuellement spécifiques) pour le marquage et la conjugaison.