Thermo Scientific EZ-Link NHS-PEG12-Biotine permet un marquage simple et efficace à la biotine des anticorps, des protéines et de toute autre macromolécule–contenant des amines primaires. Le bras espaceur hydrophile de polyéthylène glycol (PEG) confère une solubilité dans l’eau transférée à la molécule biotinylée. Par exemple, les anticorps marqués avec NHS-PEG4-Biotine présentent moins d’agrégation lorsqu’ils sont stockés en solution par rapport aux anticorps marqués avec des réactifs n’ayant que des espaceurs d’hydrocarbures. Le marquage spécifique des protéines de surface cellulaire est une autre application utile pour ces réactifs hydrosolubles et imperméables à la membrane.

Les produits Thermo Scientific No-Weigh sont des réactifs spéciaux fournis dans un format pré-aliquoté. L’emballage pré-pesé évite la perte de réactivité et de contamination des réactifs au fil du temps en évitant l’ouverture et la fermeture répétitives du flacon. Ce format permet l’utilisation d’un flacon de réactif frais à chaque fois, éliminant ainsi les tracas liés à la pesée de petites quantités de réactifs et réduisant les préoccupations quant à la stabilité des réactifs.

Caractéristiques d’EZ-Link NHS-PEG12-Biotine :

• Marquage des protéines — anticorps biotinylés pour faciliter l’immobilisation, la purification ou la détection à l’aide de sondes ou de résine de streptavidine
• Réactif aux amines — réagit avec les amines primaires (-NH2), tels que les chaînes latérales de la lysine (K) ou avec les amines N-terminales des polypeptides
• Pégylé — le bras espaceur contient un groupe hydrophile de polyéthylène glycol (PEG) à 12 unités
• Améliore la solubilité — la pégylation confère une solubilité dans l’eau à la molécule biotinylée, ce qui permet de prévenir l’agrégation des anticorps biotinylés stockés en solution
• Irreversible — formation de liaisons amides permanentes ; le bras espaceur ne peut pas être clivé
• Très longue portée — le bras espaceur (longueur totale ajoutée à la cible) est de 56 angstroms ; ceci réduit l’encombrement stérique lors de la liaison aux molécules d’avidine

NHS-PEG12-Biotine est un très long (56,0Å) réactif de biotinylation d’ester NHS pégylé et hydrosoluble pour marquer les amines et maximiser la solubilité des anticorps et d’autres protéines. Le groupe ester N-hydroxysuccinimide (NHS) réagit spécifiquement et efficacement avec les groupes amino lysine et d’extrémité N-terminale à un pH de 7-9 pour former des liaisons amides stables. Le bras espaceur de polyéthylène glycol (PEG) hydrophile confère une hydrosolubilité qui est transférée vers la molécule biotinylée, réduisant ainsi l’agrégation des protéines marquées stockées en solution. Le bras espaceur PEG permet également au réactif d’établir une connexion longue et flexible afin de réduire l’obstacle stérique pour la liaison aux molécules d’avidine.

Nous fabriquons des réactifs de biotine pour garantir l’intégrité, la cohérence et les performances globales les plus élevées possibles pour les applications de recherche prévues.

Les esters N-Hydroxysulfosuccinimide (NHS) de la biotine sont les réactifs de biotinylation les plus populaires. Les biotines activées par NHS réagissent efficacement avec les groupes amines primaires (-NH2) des tampons alcalins pour former des liaisons amides stables. Les protéines (par ex., anticorps) possèdent plusieurs amines primaires qui sont disponibles sous forme de cibles pour le marquage, notamment la chaîne latérale des résidus de lysine (K) et les extrémités N-terminale de chaque polypeptide.

Grande variété de biotines Les réactifs d’ester NHS diffèrent en longueur, solubilité, perméabilité cellulaire et clivabilité. Les réactifs NHS-biotine non sulfonatés sont perméables aux cellules, mais doivent être dissous dans un solvant organique comme le DMSO ou le DMF. Les sulfo-NHS biotine (et ceux avec les espaceurs pégylés) sont directement solubles dans l’eau mais pas perméables aux membranes. Les variétés contenant des ponts disulfures peuvent être clivées à l’aide d’agents de réduction ; il est alors possible de déconnecter le groupe biotine de la protéine marquée.