La résine d’affinité Thermo Scientific Pierce Anti-DYKDDDDK fournit une méthode rapide et pratique pour la purification et l’immunoprécipitation (IP) des protéines marquées au DYKDDDDK exprimées dans des systèmes d’expression protéique in vitro, de bactéries, de levures et de cellules de mammifères. La séquence d’acides aminés DYKDDDDK, communément appelée “FLAG” est reconnue par un anticorps monoclonal de rat de haute affinité (clone L5) qui est fixé de manière covalente à la résine UltraLink Biosupport. UltraLink Biosupport est une résine rigide, hydrophile, hautement réticulée, copolymérique et poreuse avec une grande capacité de couplage. La porosité, la rigidité et la durabilité de la résine la rendent également adaptée aux techniques à haut débit et à pression moyenne impliquant de grands volumes d’échantillons.

Pour la purification des protéines ou l’IP, la résine est ajoutée à un échantillon contenant des protéines marquées au DYKDDDDK avec le marquage sur les extrémités N ou C. Après la capture des protéines marquées au DYKDDDDK, les protéines non spécifiquement liées peuvent être lavées avant de dissocier les protéines cibles liées avec un tampon d’élution. La résine d’affinité Pierce Anti-DYKDDDDK est recommandée pour une utilisation dans les colonnes de purification par centrifugation ou les cartouches pour les instruments FPLC.

Caractéristiques :
• spécifique—les microbilles de base unique et les anticorps hautement spécifiques minimisent la liaison hors cible (liaison non spécifique faible)
• haute pureté—le protocole optimisé lier-laver-éluer permet une haute pureté
• rendements élevés—la méthode spéciale de conjugaison des anticorps permet des rendements élevés
• rapide—le protocole de purification entier prend généralement moins de 40 minutes
• économique—le protocole de purification permet de multiples réutilisations
• polyvalente—peut être utilisée dans les méthodes de purification et d’enrichissement par centrifugation, gravité ou FPLC
• évolutive—disponible en boîtes de 1, 5 et 50 ml de résine réglée pour permettre des immunoprécipitations à plus petite échelle ou des purifications à plus grande échelle

Caractéristiques de la résine d’affinité Pierce Anti-DYKDDDDK :

Composition : anticorps anti-DYKDDDDK fixé de manière covalente à la résine UltraLink Biosupport un support rigide, hautement réticulé
Taille des particules : 50–80 µm
Stabilité du pH : 1–13
Vitesse linéaire recommandée : <150 cm/heure
Température de fonctionnement : 2–30°C ; ne pas congeler
Concentration des particules :suspension à 50 % dans une solution saline dans un tampon phosphate, azoture de sodium à 0,02 %, pH 7,5
Capacité de liaison : ≥3,0 mg de protéine DYKDDDDK-tGFP-His (∼ 32 kDa)/ml de résine réglée