Thermo Scientific EZ-Link Sulfo-NHS-SS-Biotine est un réactif de biotinylation à l’ester NHS, hydrosoluble, dont le bras espaceur comprend une liaison de disulfure clivable pour le marquage réversible des protéines et des amines primaires de surface cellulaire.

Caractéristiques d’EZ-Link Sulfo-NHS-SS-Biotine

• Marquage de protéine – anticorps biotinylés pour faciliter l’immobilisation, la purification ou la détection
• Marquage de la surface cellulaire – seules les protéines présentes à la surface de cellules entières sont biotinylées car le réactif, chargé négativement, ne pénètre pas les membranes cellulaires
• Réactif aux amines — réagit avec les amines primaires (-NH2), tels que les chaînes latérales de la lysine (K) ou avec les amines N-terminales des polypeptides
• Clivable — la liaison de disulfure dans le bras espaceur permet d’éliminer le marqueur de biotine à l’aide d’agents de réduction tels que le DTT ; seul un petit groupe de sulfhydryles reste fixé à la molécule
• Soluble – le groupe chargé sulfo-NHS augmente l’hydrosolubilité du réactif par rapport aux composés ordinaires à base d’ester NHS
• Longueur moyenne — le bras espaceur (longueur totale ajoutée à la cible) est de 24,3 angströms ; il se compose du groupe acide valérique de la biotine native étendu par une chaîne de 7 atomes

Sulfo-NHS-SS-Biotine est un réactif de biotinylation réactif à l’amine qui contient un bras espaceur étendu pour réduire les obstacles stériques associés à la liaison à l’avidine. Ce réactif est hydrosoluble, et permet d’effectuer une biotinylation en l’absence de solvants organiques tels que le DMSO ou le DMF pour les applications qui ne tolèrent pas les solvants ou qui sont compliquées par leur inclusion. Ce composant très utile pour le marquage et la purification des protéines de surface cellulaire car son groupe de sulfonates l’empêche de traverser les membranes cellulaires et son bras espaceur clivable permet de libérer les protéines initialement biotinylées des colonnes d’affinités à la streptavidine.

Nous fabriquons les réactifs de biotine de manière à ce que leurs intégrité, homogénéité et performance soient des plus élevées, en fonction des applications de recherche ciblées.

Les esters N-Hydroxysulfosuccinimide (NHS) de la biotine sont le type de réactif de biotinylation le plus populaire. Les biotines activées par NHS réagissent efficacement avec les groupes amines primaires (-NH2) des tampons alcalins pour former des liaisons amides stables. Les protéines (p. ex., les anticorps) possèdent généralement plusieurs amines primaires qui sont disponibles comme cibles pour le marquage, notamment la chaîne latérale des résidus de lysine (K) et l’extrémité N-terminal de chaque polypeptide.

Variétés de biotine les réactifs Ester NHS diffèrent en longueur, solubilité, perméabilité cellulaire et clivabilité. Les réactifs NHS-biotine non sulfonatés sont perméables aux cellules, mais doivent être dissous dans un solvant organique comme le DMSO ou le DMF. Les sulfo-NHS biotine (et ceux avec les espaceurs pégylés) sont directement solubles dans l’eau mais pas perméables aux membranes. Les variétés contenant des liaisons disulfures peuvent être clivées à l’aide d’agents de réduction ; il est alors possible de déconnecter le groupe biotine de la protéine marquée.

Produits associés
EZ-Link™ Kit de biotinylation Sulfo-NHS-SS
EZ-Link™ Kit de biotinylation Micro Sulfo-NHS-SS
Pierce™ Premium Grade Sulfo-NHS-SS-Biotine