Thermo Scientific Pierce Trypsin/Lys-C Protease Mix, MS-Grade est un mélange sérine endoprotéinase de classe spectrométrie de masse (MS) de la trypsine et LysC qui peut être utilisé pour la digestion simultanée des protéines pour une digestion plus efficace qu’avec la trypsine seule.

Caractéristiques de Trypsin/Lys-C Protease Mix, MS-Grade :
• Digestion améliorée—la combinaison d’enzymes réduit les clivages ratés tryptiques
• Pratique—protéases LysC et trypsine fournies à un rapport optimisé pour la digestion dans un format à usage combiné
• Sélectivité exceptionnelle—la trypsine a une spécificité >95 % d’extrémité C-terminale de lysine et d’arginine ; LysC a une spécificité >90 % d’extrémité C-terminale de clivage de la lysine
• Stable—mélange enzymatique fourni dans un format lyophilisé

La caractérisation, l’identification et la quantification de protéines par MS commencent par une digestion protéique efficace et reproductible. Bien que la trypsine soit couramment utilisée pour la digestion protéique, cette protéase seule ne suffit pas à digérer complètement les protéines à l’extrémité carboxylique des résidus de lysine et d’arginine. Par conséquent, la protéase Lys-C est généralement associée à la trypsine pour digérer séquentiellement les protéines avec moins de clivages manqués. Le mélange protéase Pierce Trypsine/Lys-C est un mélange lyophilisé de protéases trypsine et LysC qui a été optimisé pour améliorer l’efficacité de digestion des protéines. Il est fourni dans des formats flexibles de 20 µg, 5 x 20 µg ou 100 µg et est également inclus dans le kit de préparation d’échantillons EasyPep Mini MS.

La protéase de la trypsine de qualité MS dans ce mélange est dérivée d’extraits pancréatiques porcins et a été traitée au TPCK pour éliminer l’activité chymotryptique et méthylée pour améliorer la stabilité pendant la digestion. La protéase Lys-C de qualité MS est une enzyme native hautement purifiée de Lysobacter enzymogenes. Contrairement à la trypsine, la Lys-C peut cliver des lysines suivies de prolines, ce qui en fait une protéase idéale pour une utilisation en association avec d’autres protéases pour une digestion optimale des protéines. Lorsqu’elle est utilisée comme mélange, la digestion peut être effectuée en moins de 1,5–3 heures ou jusqu’à une nuit, selon le rapport enzyme-protéine. Ce mélange d’enzymes lyophilisées est stable pendant un an lorsqu’il est stocké à -20°C.

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