Les dextranes marqués sont des polysaccharides hydrophiles qui sont le plus couramment utilisés dans des études de microscopie pour surveiller la division cellulaire, suivre le mouvement des cellules vivantes et établir des rapports sur les propriétés hydrodynamiques de la matrice cytoplasmique. Le dextrane marqué est couramment introduit dans les cellules par micro-injection.
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Spécifications du dextrane :
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Marquage (Ex/Em) : Texas Red™ (595/615)•
Taille : 3 000 MW•
Charge : Zwitterionique•
Fixable : Non fixableNormes de fabrication strictes de Molecular Probes™ DextranesNous proposons plus de 50 conjugués de dextrane fluorescents et biotinylés dans plusieurs gammes de poids moléculaire. Les dextranes sont des polysaccharides hydrophiles caractérisés par leur poids moléculaire de modéré à élevé, une bonne hydrosolubilité et une faible toxicité. Ils présentent également une faible immunogénicité. Les dextranes sont biologiquement inertes en raison de leurs liaisons poly-(α-D-1,6-glucose) peu communes, qui les rendent résistantes au clivage par la plupart des glycosidases cellulaires endogènes.
Dans la plupart des cas, les dextranes fluorescentes Molecular Probes™ sont beaucoup plus brillantes et ont une charge négative plus élevée que les dextranes disponibles auprès d’autres sources. De plus, nous utilisons des méthodes rigoureuses pour éliminer le plus de colorants non conjugués possible, puis doser nos conjugués de dextrane par chromatographie sur couche mince pour assurer l’absence de contaminants à faible poids moléculaire.
Une large sélection de substituants et de poids moléculairesLes dextranes Molecular Probes™ sont conjugués à la biotine ou à une grande variété de fluorophores, dont sept de nos colorants Alexa Fluor™ (
Conjugués de dextrane Molecular Probes–Tableau 14.4) et sont disponibles dans les poids moléculaires nominaux suivants (MW) : 3 000 ; 10 000 ; 40 000 ; 70 000 ; 500 000 ; et 2 000 000 daltons.
Charge nette et fixabilité du dextraneNous utilisons le couplage succinimidyle de nos colorants à la molécule de dextrane, ce qui, dans la plupart des cas, produit un dextrane neutre ou anionique. La réaction utilisée pour produire les dextranes Rhodamine Green™ et Alexa Fluor
™ 488 génère un produit final neutre, anionique ou cationique. Les dextranes Alexa Fluor
™, Cascade Blue
™, jaune lucifer, fluorescéine et Oregon Green
™ sont intrinsèquement anioniques, tandis que les dextranes marqués avec de la rhodamine B zwitterionique, de la tétraméthylrhodamine et du Texas Red™ sont essentiellement neutres. Pour produire des dextranes plus fortement anioniques, nous avons développé une procédure exclusive pour ajouter des groupes chargés négativement aux portoirs de dextranes ; ces produits sont désignés sous le terme de dextranes “polyanioniques” .
Certaines applications nécessitent que le traceur de dextrane soit traité avec du formaldéhyde ou du glutaraldéhyde pour une analyse ultérieure. Pour ces applications, nous offrons des versions “fixables par lysine” de la plupart de nos conjugués de dextranes de fluorophores ou de biotine. Ces dextranes possèdent des résidus de lysine liés de manière covalente qui permettent aux traceurs de dextrane d’être conjugués à des biomolécules environnantes par fixation médiée par aldéhyde pour détection subséquente par des techniques immunohistochimiques et ultrastructurelles. Nous avons également montré que tous nos conjugués de dextrane Alexa Fluor de 10 000 MW
™ pouvaient être fixés avec des fixateurs à base d’aldéhyde.
Applications clés qui utilisent des dextranes marquésIl existe une multitude de citations qui décrivent l’utilisation de dextranes marqués. Certaines des utilisations les plus courantes incluent :
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Traçage neuronal (antérograde et rétrograde) dans les cellules vivantes•
Traçage de lignées cellulaires dans les cellules vivantes•
Traçage neuroanatomique•
Examen des communications intercellulaires (par exemple, dans les jonctions lacunaires, pendant la cicatrisation des plaies, et pendant le développement embryonnaire)•
Étude de la perméabilité vasculaire et de l’intégrité de la barrière hémato–encéphalique•
Suivi de l’endocytose•
Surveillance de l’acidification (certains conjugués de colorant–dextrane sont sensibles au pH)•
Étude des propriétés hydrodynamiques de la matrice cytoplasmiqueÀ des fins de recherche uniquement. Non destiné à des fins thérapeutiques ou diagnostiques humaines ou animales.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.