L’ARN polymérase du bactériophage SP6 Thermo Scientific est une ARN polymérase ARN-dépendante avec une spécificité stricte pour leurs promoteurs double brin respectifs. Elle catalyse la synthèse 5’→3’ de l’ARN sur l’ADN simple brin ou l’ADN double brin en aval de son promoteur et incorpore des nucléotides modifiés.

Mises en évidence

• Incorpore des nucléotides modifiés (par exemple des nucléotides marqués à l’amino-allyle, la biotine, la fluorescéine, la digoxigénine)

Applications

• Synthèse d’ARN non marqué et marqué qui peut être utilisée :
• Pour l’hybridation, la translation in vitro de l’ARN
• Comme aARN, siARN, substrat dans les dosages de protection RNase, modèle pour le séquençage de l’ADN génomique
• Dans les études de la structure secondaire de l’ARN et des interactions ARN-protéines, épissage de l’ARN

Séquence du promoteur consensuelle :
SP6 : ATTTAGGTGACACTATAGAAGNG