ProcartaPlex™ Human Cytokine & Chemokine Convenience Panel 1A, 34plex
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ProcartaPlex™ Human Cytokine & Chemokine Convenience Panel 1A, 34plex

Le panneau de convenance de cytokine / chimiokine humaines 34-Plex ProcartaPlex 1 permet d’étudier la fonction immunitaire en analysant 34Afficher plus
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RéférenceQuantité
EPXR340-12167-90196 dosages
Référence EPXR340-12167-901
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Le panneau de convenance de cytokine / chimiokine humaines 34-Plex ProcartaPlex 1 permet d’étudier la fonction immunitaire en analysant 34 cibles protéiques dans un seul puits à l’aide de la technologie Luminex xMAP. Le panneau est fourni dans un format prêt à l’emploi avec des flacons individuels de réactifs de capture et de détection formulés à une concentration de 1X, nécessitant moins de pipetage et de configuration expérimentale. Les mêmes cibles peuvent être trouvées dans le panneau de cytokine / chimiokine humaines 34-Plex ProcartaPlex 1A (EPX340-12167-901) qui offre un format modulaire permettant une plus grande flexibilité pour augmenter ou diminuer le nombre de cibles.

Les panneaux préconfigurés ProcartaPlex sont largement testés pour la combinabilité, l’interférence et la réactivité croisée des analyses afin de fournir le plus haut niveau de validation et de précision. Tous les panneaux ProcartaPlex sont fournis avec les réactifs nécessaires pour effectuer le dosage.

Les panneaux multiplex ProcartaPlex sont disponibles en plusieurs formats et peuvent être utilisés sur six espèces (humain, souris, rat, primate non humain, porcin et canin). Consultez notre page d’dosages immunologiques ProcartaPlex pour plus d’informations et de produits disponibles.

Liste de cibles [région de microbille] :
Th1 / Th2 : GM-CSF [44], IFN gamma [43], IL-1 bêta [18], IL-2 [19], IL-4 [20], IL-5 [21], IL-6 [25], IL-8 [27], IL-12p70 [34], IL-13 [35], IL-18 [66], TNF alpha [45]

Th9 / Th17 / Th22 / Treg : IL-9 [52], IL-10 [28], IL-17A (CTLA-8) [36], IL-21 [72], IL-22 [76], IL-23 [63], IL-27 [14]

Cytokines inflammatoires : IFN alpha [48], IL-1 alpha [62], IL-1RA [38], IL-7 [26], IL-15 [65], IL-31 [37], TNF bêta [54]

Chimiokines : Éotaxine (CCL11) [33], GRO alpha (CXCL1) [61], IP-10 (CXCL10) [22], MCP-1 (CCL2) [51], MIP-1 alpha (CCL3) [12], MIP-1 bêta (CCL4) [47], RANTES (CCL5) [42], SDF-1 alpha [13] 

À propos des dosages ProcartaPlex pour la plateforme Luminex
Les immunodosages ProcartaPlex, basés sur les principes d’un ELISA en sandwich, utilisent deux anticorps hautement spécifiques se liant à différents épitopes d’une protéine pour quantifier simultanément toutes les cibles protéiques à l’aide d’un instrument Luminex. Les dosages multiplex ProcartaPlex nécessitent seulement seulement 25 µl de plasma ou de sérum, ou 50  µl de surnageant de culture cellulaire, et seulement quatre heures pour obtenir les résultats analysés.

Caractéristiques :
• Résultats reproductibles et fiables : validés en panneau selon la norme la plus élevée de l’industrie, avec des tests de combinabilité des cibles protéiques et de réactivité croisée
• Plus de résultats par échantillonneur : permet de réaliser simultanément plusieurs cibles protéiques dans un seul échantillon de 25 à 50 µl
• Plateforme de multiplexage à haute référence avec la technologie bien établie Luminex, pour la détection et la quantification des protéines

Les dosages ProcartaPlex utilisent la technologie Luminex xMAP (profilage multianalyte) pour la détection et la quantification simultanées d’un maximum de 80 cibles protéiques dans un seul échantillon de 25 à 50 µl — de plasma, de sérum, de surnageant de culture cellulaire et d’autres liquides corporels.

Les microbilles Luminex dans le dosage ProcartaPlex sont colorées en interne avec des proportions précises de fluorophores rouges et IR pour créer des signatures uniques de façon spectrale qui peuvent être identifiées par les systèmes de détection Luminex xMAP (par exemple Luminex 200, FLEXMAP 3D et MAGPIX). Comme le dosage ELISA sandwich, le dosage ProcartaPlex utilise des paires d’anticorps appariées pour identifier la protéine d’intérêt. Dans un dosage multiplexé, chaque microbille unique de façon spectrale est marquée avec des anticorps spécifiques pour une seule protéine cible et les protéines liées sont identifiées avec des anticorps biotinylés et de la streptavidine–R-phycoérythrine (RPE). La conjugaison d’anticorps spécifiques d'une protéine à une microbille distincte permet d’analyser plusieurs cibles dans un seul puits.

La différence la plus significative entre un dosage ProcartaPlex et un dosage ELISA est que l’anticorps de capture du dosage ProcartaPlex est conjugué à une microbille et n’est pas adsorbé par un des puits de la microplaque. Ainsi, les réactifs de dosage ProcartaPlex flottent librement dans la solution. Pour la détection, l’instrument Luminex 200, par exemple, contient deux lasers : un pour distinguer la signature spectrale de chaque microbille et un autre pour quantifier la quantité de fluorescence de la RPE. Cette dernière est proportionnelle à la quantité de protéine présente dans l’échantillon. Les dosages multiplex ProcartaPlex peuvent profiler plus de protéines cibles à l’aide d’un échantillon nettement moins important. Cela leur prend autant de temps que pour effectuer un dosage ELISA sandwich traditionnel.

Les panneaux multiplex ProcartaPlex sont disponibles en plusieurs formats et peuvent être utilisés sur six espèces (humain, souris, rat, primate non humain, porcin et canin). Consultez la page thermofisher.com/procartaplex pour plus d’informations et pour les produits disponibles.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Plage de dosageVoir le certificat d’analyse
Sensibilité du dosageVoir le certificat d’analyse
À utiliser avec (équipement)Instruments Luminex™
FormatKit multiplex
Gamme de produitsProcartaPlex™
Type d’échantillonSérum, plasma, surnageants de culture cellulaire (SCC), Plasma, Cell Culture Supernatants
Volume d’échantillonSérum, plasma : 25 µl, surnageant de culture cellulaire : 50 µl, Sérum, plasma : 25 μl ; CCS : 50 μl
Conditions d’expéditionGlace humide
CombinabilityNon combinable
Type de produitPanneau multiplex
Quantité96 dosages
Research AreaImmunology, Cytokines, Chemokines
EspècesHumaine
Unit SizeEach
Contenu et stockage
• 2 flacons de mélange standard humain A (lyophilisé)
• 2 flacons de mélange standard humain B (lyophilisé)
• 1 flacon de mélange de microbilles de capture (1X)
• 1 flacon de mélange d’anticorps de détection biotinylés (1X)
• 1 flacon de tampon de lecture (1X)
• 1 flacon de tampon de lavage (10x)
• 1 flacon de streptavidine-PE (1X)
• 1 flacon de tampon de dosage universel (1X)
• Barrette de 8 tubes
• Film adhésif
• Plaque de 96 puits à fond plat, noire

À conserver entre 2 et 8°C.
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Foire aux questions (FAQ)

What is the size of the Luminex beads you currently use?

The beads used in our Luminex instrument-compatible ProcartaPlex and QuantiGene Plex assays are 6.5 micron superparamagnetic beads.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

I am interested in performing Luminex assays using BioSource kits, and I have a Luminex xMAP system. Besides the kits and system, what other reagents and equipment will I need?

The following is a list of general lab supplies that are required for running BioSource immunoassays on the Luminex xMAP system:
1) Sonicating water bath
2) Orbital shaker
3) Vortexer
4) Repeating and/or multi-channel pipetter (not required, but recommended)
5) Calibrated adjustable precision pipettes, with disposable plastic tips
6) Glass/plastic tubes and racks for preparing reagents
7) Graduated cylinder and container for preparing wash solution
8) Aluminum foil
9) Deionized or distilled water.

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Do the Luminex beads require special care in handling?

The Luminex beads should be protected from light because they are susceptible to photobleaching. We recommend protecting the beads by keeping containers covered with aluminum foil during all incubation steps, and exercising care during handling. The beads should not be frozen, subjected to excessive heat, or exposed to organic solvents.

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Why would the Luminex acquisition software display "Sample Empty" messages during analysis?

(1) The user did not properly aliquot the diluted beads, such that no beads were actually added to the wells (make sure that the bead concentrates are sonicated and vortexed well, then check the pipet tip to ensure that air bubbles were not drawn up)
(2) The user missed loading diluted beads to some wells, which is likely since the small volume is clear and difficult to visualize in the clear plastic plate (we have now addressed this customer difficulty by coloring each of the Buffer Reagent Kit components)
(3) The user applied too much vacuum pressure at some point during the wash steps, or allowed the pressure to spike even once, such that the filter membrane tore in a few wells releasing the beads (make sure that the vacuum manifold pressure is kept below 5mm/in Hg, depending on their system -- a good rule of thumb is that it should take a full 3-second count to GENTLY empty the wells of 200uL)
(4) The user did not properly sonicate and vortex the beads prior to dilution, such that the percent of bead aggregation was high and the instrument was unable to find enough single beads to meet the events/bead value designated by the customer (make sure that the Bead Concentrate tube is put into the waterbath all the way to the cap, since the tube is hollow until the top third)
(5) The user lost beads by shaking the plate too aggressively or handling it improperly (make sure that the orbital shaker is set to a speed that allows for maximum vortex in the wells without spillage)
(6) The user exposed the beads to an excess of light during storage or running of the assay, such that some but not all of the beads were photobleached and therefore falling outside the acceptable range for each bead region (make sure that the plate is covered on the top/sides with foil throughout the assay, away from Windows and spotlights, and that the bead component of the kits is stored in the dark)*
(7) There was a clog in the sample needle, such that the instrument was unable to take up enough sample to meet the number of events requested per bead region (suggest that the user follow the manual instructions for dislodging a clog, which include several Back Flush steps and may require removal of the needle for sonication with probe alignment).

* Some of the older Antibody Bead Kits still have clear plastic tops instead of black ones. In cases where customers store kits in lit refrigerators, or keep them open on the lab bench, even a few hours of light exposure is enough to photobleach beads. It is important to note, in general, that higher number bead regions are more susceptible to photobleaching. In order to draw conclusions about the source of the difficulty, we would ask to see the data, specifically the Masterplex QT file, which would enable us to examine the pattern of "Sample Empty" occurrences in addition to the bead counts per well.

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What are the Luminex beads made of?

The beads are made of polystyrene.

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Documentation et téléchargements

Certificats

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