5’

A

C

C

T

G

C

N4

↓

3’

3’

T

G

G

A

C

G

N8

↑

5’

L’enzyme de restriction Thermo Scientific BveI (BspMI) reconnaît les sites ACCTGC(4/8)^ et sa coupe est optimale à 37°C dans le tampon O (+oligo) (isoschizomères : Acc36I, BfuAI, BspMI). Reportez-vous aux Conditions de réaction des enzymes de restriction pour disposer d’un tableau sur l’activité enzymatique, les conditions de double digestion, et l’inactivation par la chaleur pour cette enzyme de restriction et d’autres. Remarque : Également disponible en tant qu’enzyme FastDigest pour une digestion rapide de l’ADN.

Les endonucléases de restriction classique Thermo une grande collection d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. En outre, le tampon Tango universel est fourni pour des raisons de commodité dans les digestions doubles. Toutes les enzymes présentent une activité de 100 % dans le tampon et les conditions de réaction recommandés. Pour garantir des performances constantes, les tampons d’enzymes de restriction Thermo Scientific contiennent de la BSA prémélangée, ce qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants éventuellement présents dans les préparations d’ADN.

Caractéristiques

• Qualité supérieure : contrôle qualité rigoureux et processus de fabrication de pointe du secteur
• Système à cinq tampons avec code couleur pratique
• Comprend un tampon Tango universel pour les digestions doubles
• BSA prémélangé dans des tampons de réaction
• Large sélection de spécificités d’endonucléases de restriction

Applications

• Clonage moléculaire
• Cartographie des sites de restriction
• Génotypage
• Transfert Southern
• Polymorphisme de longueur de fragments de restriction
• SNP

Remarque : Au moins deux copies de Bvel sont nécessaires pour un clivage efficace. L’ajout de 0,5 µM d’oligonucléotide avec la séquence de reconnaissance Bvel dans le mélange de réaction améliore significativement le clivage des ADN plasmides, en particulier ceux disposant d’un seul site BveI. Il est cependant difficile d’obtenir un clivage complet de certains substrats avec BveI. La concentration de BveI est déterminée par le taux maximal de clivage obtenu lorsque le schéma de fragmentation observé ne présente aucun changement avec une augmentation supplémentaire de la quantité d’enzyme. Une faible concentration en sels, une forte concentration en glycérol (> 5 %), un pH > 8,0 ou un large excès d’enzyme peut induire une activité Star. Bvel peut rester associée à l’ADN clivé. Cela peut provoquer un décalage de la bande d’ADN pendant l’électrophorèse. Pour éviter les modèles de bandes d’ADN atypiques, utiliser le colorant de charge d’ADN 6X et une solution SDS pour la préparation des échantillons, ou chauffer l’ADN digéré en présence de SDS avant l’électrophorèse. Pour la sensibilité à la méthylation, se référer aux caractéristiques du produit.