Le milieu 254 est un milieu de culture tissulaire liquide, stérile et préparé avec 200 µM de chlorure de calcium pour la culture des mélanocytes épidermiques humains normaux. Ce milieu doit être utilisé comme un composant dans un environnement de culture complet. Lorsqu’ils sont complétés par HMGS, HMGS-2, le milieu 254 supporte l’étalement et la prolifération des mélanocytes à des densités de culture comprises entre 5 x 10³ cellules / cm² et 1 x 10⁵ cellules / cm². D’autres applications peuvent inclure l’isolement primaire des mélanocytes de la peau.

Le milieu 254 est un milieu basal contenant des acides aminés indispensables et non indispensables, des vitamines, d’autres composés organiques, des minéraux à l’état de traces et des sels inorganiques. Ce milieu ne contient pas d’antibiotiques, d’antimycosiques, d’hormones, de facteurs de croissance ni de protéines. Ce milieu est tamponné de HEPES et de bicarbonate et est conçu pour être utilisé dans un incubateur avec une atmosphère de 5 % de CO² et 95 % d’air. Pour favoriser l’étalement et la prolifération à long terme des mélanocytes humains normaux, le milieu 254 doit être complété par le supplément de croissance des mélanocytes humains (HMGS) ou le supplément 2 de croissance des mélanocytes humains sans PMA (HMG-2). Chacun de ces suppléments contient tous les facteurs de croissance, les hormones et les extraits tissulaires nécessaires à la croissance des mélanocytes dans le milieu 254.