Blue Carrierタンパク質および付属のThermo Scientific EDCコンジュゲーションキットは、軟体動物由来の非常に水溶性の高いヘモシアニンのパッケージで、アミンまたはカルボキシルペプチド抗原を用いた効果的な免疫原を簡単に調製できます。
Imject EDC Blue Carrierタンパク質スピンキットの特長:
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便利なキット — 凍結乾燥Blue Carrierタンパク質(MESバッファー中)、EDC架橋剤、アクセサリコンポーネントが入ったキットで、すぐに使える注入用免疫原を簡単に調製できる
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高収量コンジュゲーション — CCHの各分子には数百の一級アミンが含まれており、EDCまたはNHSエステル架橋剤によってハプテンを結合できる
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検証済みの品質 — 化学構造と溶解性が均一になるよう特別に精製された免疫原性キャリアタンパク質で、性能が一貫している
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優れた溶解性 — KLHよりも溶解性が高いため、Blue Carrierタンパク質は幅広い結合プロトコルで特殊なハプテンや溶解性の低いハプテンに使用可能
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高い免疫原性 — 免疫原性と系統的距離はキーホールリンペットヘモシアニン(KLH)と本質的に同一レベル
Blue Carrierタンパク質は
Concholepas concholepasヘモシニアン(CCH)の精製調製物であり、抗体産生時に注入や免疫化に使用する合成抗原に高い免疫原性を付与します。大きなタンパク質は、代表的なキャリアタンパク質である、キーホールリンペットヘモシアニン (KLH) とほぼ同じ免疫原性特性を示します。ただし、溶解性が非常に高いため、グルタルアルデヒド、スルホ-SMCC、EDCなどの従来のクロスリンカーを用いてペプチド、タンパク質、その他のハプテンを結合する際に幅広いバッファーやpH条件を使用できるようになり、免疫原の調製プロトコルの柔軟性が向上します。免疫原の調製を簡単に行えるように、Thermo Scientific Imject EDC Blue Carrierスピンキットもご用意しています。
Blue Carrierタンパク質の特性:•
別名:Concholepas concholepasヘモシアニン、CCH
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分子量:全分子:約8,000,000;サブユニット:約400,000および約350,000
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吸収:最大280 nm、350 nm、558 nm
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吸光係数(A 1 mg/mL溶液):280 nmで1.4、346 nmで0.35
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A280/A350比:約4.0
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銅/タンパク質比:約16 Cu
2+/タンパク質分子
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等電点:6.0
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溶解度:水性バッファーに溶解:pH 7.0~8.0
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安定性:水性バッファー中で安定:約pH 7.2、Ca
2+またはMg
2+を含まない
キャリアタンパク質は、注入することで免疫応答を誘発できる大きく複雑な分子です。小さな抗原(ペプチドまたは薬物化合物)に対する特異的な抗体を確実に生成するには、これらハプテンをより大きく複雑な分子(通常はタンパク質)に共有結合させ、免疫原性を高める必要があります。キャリアタンパク質は、免疫原性、溶解性、および適切なレベルのハプテン-キャリアコンジュゲーションを達成できるかどうかに基づいて選択します。
Blue Carrier Proteinは、軟体動物の
Concholepas concholepas(ロコガイ)から特別に精製したヘモシアニンです。CCHタンパク質は、2つの巨大なポリペプチドのサブユニット(404および351 kDa)で構成されており、二価陽イオンが存在しない場合でも、安定性の非常に高いヘテロ二量体構造を形成します。(対照的に、KLH は安定性と可溶性の低いホモ二量体構造を持っています)。CCHサブユニットの複雑な分子配列は、TおよびBリンパ球が媒介する強力な免疫反応を誘発する多様な反復抗原構造を含んでいます。
KLHおよびCCHヘモシアニンは、分子量が大きくて分子が複雑なことから、ハプテンやペプチドに対する抗体を産生するための免疫原として適したキャリアタンパク質です。さらに、いくつかの研究により、動物と人間に含まれるヘモシアニンに誘発される強力な DTH 免疫応答が、ある種のがんに良好な治療効果を持つことが示唆されています。がんの免疫療法の新たな展開として、ヘモシアニンのユニークな免疫原性を利用し、新興疾患の治療を目的とした新しいコンジュゲートワクチンを開発しています。
カルボジイミドクロスリンカー
EDCはカルボキシル含有ハプテン(ペプチド抗原のC末端など)をBSAキャリアタンパク質に結合させます。この EDC を用いる免疫原の調製法は、配列の中央部にアスパラギン酸残基やグルタミン酸残基 (カルボン酸塩) およびリジン残基 (一級アミン) を持たないペプチド抗原に理想的な方法です。ペプチドにはカルボキシレートとアミンの両方が含まれるため、EDC を用いたコンジュゲーションでは、ペプチド抗原の重合とキャリアタンパク質に対するコンジュゲーションがランダムに行われます。これにより、重合したペプチド抗原がキャリアタンパク質に高レベルで結合、さらに抗体産生においても、さまざまな配向でペプチド抗原の提示が行われることになります。しかし、ペプチド抗原の内部配列に、一級アミン (リジン残基) またはカルボキシル基 (アスパラギン酸、グルタミン酸残基) が含まれる場合、重要な (望まれる) 抗原決定部位が EDC コンジュゲーションによりブロックされることがあります。このような場合は、リン酸緩衝液中の精製されたBlue Carrierにホモバイ官能性アミン反応性架橋剤を使用するか、または独自の末端システインでペプチドを合成し、
Malemide-Activated Blue Carrierを含むキットを使用してキャリアタンパク質コンジュゲートを調製します。
詳細な製品データ•
免疫原調製用キャリアタンパク質活性化およびコンジュゲーションデータ関連製品Imject™ Blue Carrier™ Protein(滅菌PBS中)Imject™ Blue Carrier™ ProteinFor Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.