Cells-to-CT™製品ファミリーの他のメンバーと同様に、 Cells-to-CT™ 1ステップTaqMan™キットは、RNA精製なしに培養細胞から直接発現解析を行うことができます。
このファミリーへの新たな追加製品 には、TaqMan™ 1ステップRT-PCRマスターミックスが含まれます。RT-PCRステップのシングルチューブフォーマットは、“サンプルから回答までの”ワークフローをこれまで以上に効率化します。シンプルなCells-to-CT™溶解技術と1ステップRT-PCRマスターミックスの高速サイクリング機能を組み合わせることで、限られたサンプル処理で結果を得るまでの時間を短縮できます。
Cells-to-CT™ 1ステップTaqMan™キットの特長:
•完全—最適化されたワークフローには、gDNAを除去した細胞溶解試薬とTaqMan™ 1ステップRT-PCRマスターミックスが含まれています
• かつてないほど迅速に—DNase処理を含む7分間のサンプル調製と28分間のリアルタイムRT-PCRステップを組み合わせることで、約35分間のサンプルから結果を得ることができます
• シンプル—合計10ステップ(サンプル調製とリアルタイムRT-PCRの組み合わせ)
• 確実—サンプルあたり10~100,000個の細胞の遺伝子発現解析が可能であり、結果は精製RNAを使用する場合と同等
• 利便性—調製する各細胞サンプルに対して5つのリアルタイムRT-PCRを実行するのに十分な試薬が含まれています。これにより、複数のターゲットを研究したり、RT-PCRを複製したりすることができます
注:TaqMan™ プライマー/プローブセットは別売りです。
シンプルな7分間のサンプル調製、リアルタイムRT-PCRに備えるCells-to-CT™ 1ステップTaqMan™キットは、簡単な7分間のサンプル調製手順を使用します。本キットの溶解技術は、1サンプル当たり10–100,000個の培養細胞を処理できるように設計されています。細胞をPBSで洗浄後、室温で5分間、溶解液に溶解しますが、このときDNase処理も同時に行われます。溶解は室温にて停止液を用い、2分間のインキュベーションで終了します。これで、リアルタイムPCR装置でライセートを分析する準備が整いました。TaqMan™ プライマー/プローブセットを含むリアルタイムRT-PCRマスターミックスに追加するだけです。または、ライセートを–20°℃で保存することもできますサンプルは培養プレート(96ウェルまたは384ウェル)上で直接処理できるため、サンプル操作回数やサンプルロスあるいは移し替えによるエラーの可能性が最小限に抑えられ、迅速なハイスループット処理が可能になります。工程が多い従来のRNA分離プロトコルとは異なり、熱処理、洗浄、または遠心分離のステップは必要ありません。このキットでは、手間のかかる30~60分間のプロセスが大幅に簡素化され、7分まで短縮されます。
完全な実証済みのソリューションCells-to-CT™ ワンステップTaqMan™キットのすべてのコンポーネントは、一貫性と信頼性の高い性能が得られるように最適化されています。これにより、個々のサンプル調製でリアルタイムワンステップRT-PCRのマスターミックスを組み合わせる際に、勘に頼る作業がなくなります。品質保証のため、Cells-to-CT™ 1ステップTaqMan™キット™は、TaqMan遺伝子発現アッセイで検証されており、精製RNAで得られた性能と同等の性能を示します。
アクセサリ製品 TaqMan™ Cells-to-CT™コントロールキット™™は、TaqMan Cells-to-CT製品用に設計されています。このキットには、サンプルローディングのばらつきを標準化する内在性コントロール(ACTB)と、PCR阻害の影響をモニターするための人工的なXenoRNA™コントロールおよび対応するTaqMan™遺伝子発現アッセイが含まれています。