Click-iT™ Plus EdU Pacific Blue™ Flow Cytometry Assay Kit
Invitrogen™
Click-iT™ Plus EdU Pacific Blue™ Flow Cytometry Assay Kit
Click-iT™ Plus EdU Pacific Blue™フローサイトメトリーアッセイキットにより、従来のBrdU法と比較して、増殖細胞のDNA複製を分析するためのシンプルで堅牢なアッセイが可能となります。新たに合成されたDNAは、フローサイトメーターの405 nmレーザーを使用して分析されます詳細を見る
Click-iT™ Plus EdU Pacific Blue™フローサイトメトリーアッセイキットにより、従来のBrdU法と比較して、増殖細胞のDNA複製を分析するためのシンプルで堅牢なアッセイが可能となります。新たに合成されたDNAは、フローサイトメーターの405 nmレーザーを使用して分析されます。Click-iT™ Plusの組成は、R-PEやR-PEタンデムなどの標準的なフルオロフォアや蛍光タンパク質に対応しています。
マルチプレックス可能 Click-iT™ Plusの組成は、オリジナルのClick-iT™ EdUフローサイトメトリーアッセイと比べてマルチプレックス性が向上しています。Click-iT™ Plus EdUアッセイは、オリジナルのClick-iT™ EdUアッセイの精度や速度を損なうことなく、R-PEおよびR-PEタンデム、ならびにGFPやmCherryなどの蛍光タンパク質と組み合わせて使用可能
BrdUより優れた結果が得られる先進的な方法 増殖解析の最も正確な方法は、DNA合成の直接測定です。これは当初、放射性ヌクレオシドの組み込みによって行われていました。この方法は、ヌクレオシドアナログブロモデオキシウリジン(BrdU)の抗体ベースの検出に置き換えられました。Click-iT™ Plus EdUフローサイトメトリーアッセイは、BrdUアッセイの新たな代替品です。EdU(5-エチニル-2´-デオキシウリジン)は、活性DNAの合成中にDNAに取り込まれるチミジンアナログです。検出は、クリックケミストリーに基づいています。クリックケミストリーは、アジドとアルキンの間の銅触媒共有結合反応です。このアプリケーションでは、アルキンはEdUのエチニル基に、アジドはAlexa™ Fluor色素に結合しています。標準的なフローサイトメトリー法は、集団中のS期細胞の割合を測定するために使用されます。
マイルドな条件では、細胞周期色素と抗体を使用できます アジ化色素のサイズは小さいため、穏やかな条件下で組み込まれたEdUを効率的に検出できます。また、標準的なアルデヒドベースの固定および界面活性剤の浸透は、Click-iT™検出試薬でDNAにアクセスするのに十分です。これは、抗BrdU抗体で検出できるようにBrdUを露出させるために(HCl、熱、またはDNaseでの消化を使用して)DNAの変性を必要とするBrdUアッセイとは対照的です。BrdUアッセイのサンプル処理は、HCl法を使用する際に、細胞周期分布のシグナル変化や抗原認識部位の破壊を引き起こす可能性があります。対照的に、使いやすいClick-iT™ Plus EdUアッセイは、細胞周期色素に対応しています。Click-iT™ Plus EdUアッセイは、表面および細胞内マーカーに対する抗体、およびR-PE、R-PEタンデム、蛍光タンパク質(GFPおよびmCherry)などの標準蛍光色素で標識されたコンジュゲートとのマルチプレックス化も可能です。