Thermo Scientific Bond-Breaker TCEP Solution, Neutral pH는 thiol 무함유, phosphine 기반의 TCEP 화합물의 안정적인 0.5M 용액으로, 단백질 이황화결합을 줄이기 위해 SDS-PAGE 샘플 loading buffer에 첨가할 수 있는 10X 스톡으로서 유용합니다.

Bond-Breaker TCEP Solution, Neutral pH의 특징

• 무취—DTT 및 beta;-ME와 달리 TCEP는 냄새가 없어 보다 건강한 실험실 환경 조성
• 효율성—5-50mM TCEP는 몇 분 이내에 펩티드 또는 단백질 이황화결합을 크게 줄여줌(DTT만큼 효과적임)
• 특이성—가장 안정적인 수용성 알킬 이황화물을 선택적이고 완벽하게 환원
• 신속성—실온과 pH 5에서 5분 이내에 단백질 이황화물 환원
• 안정성—공기 산화 방지, 단백질에 있는 다른 작용기(functional group)에 대해 비휘발성과 비반응성을 나타냄
• 활용성—광범위한 pH, 염, 세척제, 온도 조건에서 펩티드와 단백질 환원
• 호환성—TCEP에는 sulfhydryl 기(group)가 들어 있지 않기 때문에 대다수 어플리케이션 전에 환원제를 제거하지 않아도 됨(예: 히스티딘 태그 단백질 정제, maleimide 접합)

Bond-Breaker TCEP Solution은 이황화결합 환원을 포함한 단백질과 다른 연구에 광범위하게 사용할 수 있는 강력한 무취, thiol 무함유 환원제입니다. 이 제품은 SDS-PAGE 샘플 버퍼에서 B-mercaptoethanol이나 DTT 대신 효과적이고 편리하게 사용할 수 있습니다. 이 시약의 중성 pH는 선명한 밴드를 표시해 주고 가수분해와 탄수화물 변형을 유도할 수 있는 TCEP·HCl 강산에 단백질이 노출되지 않도록 해줍니다.

Bond-Breaker TCEP Solution 사용에 따른 고려사항:
• 광범위한 pH(pH 4.0-9.0)와 온도(5 - 95°C)에서 환원이 나타납니다.
• 대다수 단백질은 변성제 없이 효율적으로 환원됩니다. 그렇지만, guanidine·HCl와 같은 변성제를 첨가하면 내부 이황화물을 Immobilized TCEP에 노출하는 데 도움이 될 수 있습니다.
• 요소(Urea)는 sulfhydryl 기(group)와 반응하는 cyanate를 형성하기 때문에 변성제로 권장되지 않습니다.
• 금속은 TCEP 활성을 감소시키기 때문에 TCEP 용액에 접촉시켜서는 안 됩니다.
• 환원 중에 샘플 버퍼에 5-20mM EDTA를 포함하면 Zn 2+, Cu 2+, Mg 2+와 같은 2가 금속으로 인한 sulfhydryl 기(group)의 재산화를 방지할 수 있습니다.
• 이황화물은 시간이 흐르면 다시 형성되기 때문에 환원된 샘플은 환원 직후 사용해야 합니다.

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