USB™ CycleSeq™Thermostable DNA Polymerase는 열안정적인 DNA 중합효소로서 엑소뉴클레아제 무첨가이고 표준 열안정 DNA 중합효소보다 훨씬 높은 효율로 ddNTP를 결합합니다. 이를 통해 더욱 균등하고 판독이 쉬운 염기서열 밴드 패턴을 얻을 수 있으며 염기서열 이상을 더 쉽게 식별할 수 있습니다.

USB CycleSeq Thermostable DNA Polymerase는 ThermoSequenase DNA polymerase로 대체될 수 있는데 두 효소 모두 변형된 뉴클레오티드를 결합할 수 있기 때문입니다(그림 1 참조).

CycleSeq DNA Polymerase는 Thermo Sequenase DNA Polymerase와 마찬가지로 Thermoplasma acidophilum 무기 피로인산가수분해효소(TAP)를 포함합니다. TAP는 열안정성이 있으며 피로인산가수분해효소를 정인산염으로 전환하는데 이는 피로인산가수분해효소가 생산되는 순환식 염기서열분석 반응 과정에서 유용한 특징입니다.

USB CycleSeq Thermostable DNA Polymerase는 균일한 밴드 강도를 가진 염기서열 데이터를 생성하여 더 길고 정확한 염기서열 판독이 가능하기 때문에 순환식 염기서열분석(Sanger 염기서열분석)에 유용합니다. 이는 또한 SNP 유전형 분석 과정에서 프라이머 확장 프로토콜을 위해 유용합니다.

소스:
재조합

순도:
SDS-PAGE에 의해 결정된 95%보다 높은 순도.

저장 완충액:
20mM Tris-HCl, pH 8.5, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 100mM KCl, 0.053단위/μl Thermoplasma acidophilum 무기 피로인산가수분해효소, 50% 글리세롤 및 안정제.

분석 조건:
반응 혼합물에는 25mM TAPS, pH 9.3, 50mM KCl, 2mM MgCl₂, 1mM Β-ME, 200μM dATP, 200μM dGTP, 200μM dTTP, 100μM dCTP, 0.05μL [α33P] dCTP (10μCi/μL), 400μg/mL 활성화 DNA 및 CycleSeq Thermostable DNA Polymerase가 들어 있습니다. 74deg;C에서 10분간 배양 후, 산-불용성 물질이 측정됩니다(50μL 반응 부피).

단위 정의:
효소의 한 단위는 표준 분석 조건일 때 74°C에서 30분간 산-불용성 형태로 10nmol dNTP의 결합을 촉진하기 위해 필요한 효소의 양으로 정의됩니다.

농도:
32단위/μL

기능 테스트:
염료 프라이머 염기서열분석에 사용하기 위한 사양을 만족 또는 초과하도록 기능적으로 시험되었습니다. 배포 사양은 염기서열 길이, 밴드 강도 및 염기서열 품질에 기초합니다. 염기서열은 또한 염기서열 해석을 간섭할 정도로 강한 백그라운드 밴드가 없어야 합니다.