PichiaPink™ Secretion Optimization Kit

PichiaPink™ Secretion Optimization Kit는 효모 Pichia pastoris를 기초로 한 새로운 재조합 단백질 발현 시스템입니다. PichiaPink™ Secretion Optimization Kit를 사용해 shake flask에서 재조합 단백질 1000L 생산까지 편리하고 비용 대비 효과적으로 생물학적 생산 작업을 수행할 수 있습니다. PichiaPink™ Secretion Optimization Kit에는 단백질 생산에 필요한 본사의 새로운 Pichia strain, pPINK-HC 및 pPINK-LC 벡터, 분비 신호 서열이 제공됩니다.

•   Pichia pastoris 단백질 생산을 시작할 수 있는 완전한 키트.
•   영양요구 및 색상 선별로 Pichia transformant를 신속하게 스크리닝하세요.
•   단백질 부족 Pichia pastoris strain으로 단백질 분해를 줄이세요.
•   8가지 분비 신호 서열 중 하나로 단백질 분비를 최적화하세요.

PichiaPink™ Secretion Optimization Kit 구성:
•   PichiaPink™ Vector Kit (Cat. No. A11152)
•   PichiaPink™ Secretion Signal Set (Cat. No. A11155)
•   PichiaPink™ Expression Strain Set (Cat. No. A11154)
•   PichiaPink™ Media Kit (Cat. No. A11156)

Pichia Transformant를 선별하는 새로운 방법
PichiaPink™ Secretion Optimization Kit는 아데노신 영양요구로 Pichia transformant를 선별합니다. PichiaPink™ strain에는 ade2 유전형이 있으며 adenine 없이 성장하기 위해서는 ADE2 유전자 보충이 필요합니다. 영양요구 표지자를 사용하면 transformant를 유지하기도 쉽습니다. Transformant 유지에는 항생제가 필요하지 않습니다.

또한 색상으로 Pichia transformant를 선별할 수 있습니다. 미변환 PichiaPink™ strain은 분홍색 집락으로 나타나며 전환 PichiaPink™ strain은 흰색 집락으로 나타납니다(그림 1).

Pichia에 대한 새로운 발현 벡터
PichiaPink™ Secretion Optimization Kit에는 새로운 PichiaPink™ Vector Kit가 제공됩니다. 이 키트에는 두 가지 벡터, pPINK-LC와 pPINK-HC가 제공됩니다. pPINK 벡터는 ade2-결핍 Pichia strain을 보충하기 위해 ADE2 유전자 주변에 사용합니다. 두 벡터 모두 메탄올 유도 AOX1 promoter를 사용해 단백질을 발현합니다. pPINK-LC는 low-copy number로 Pichia 게놈에 통합되며 pPINK-HC 벡터는 high-copy number로 통합됩니다.

pPINK-LC 및 pPINK-HC 벡터 모두 PichiaPink™ Secretion Signal Set에 호환됩니다. 3-way ligation을 사용해 8가지 분비 서열 중 하나를 여러분의 유전자에 추가할 수 있습니다. 참고: pPINK 벡터는 기본적으로 세포 내에서 단백질을 발현합니다.

PichiaPink™ Vector Kit (Cat. No. A11152) 및 PichiaPink™ Secretion Signal Set (Cat. No. A11155) 모두 별도로 주문하여 PichiaPink™ Secretion Optimization Kit를 채울 수 있습니다.

단백질을 온전하게 유지하세요.
PichiaPink™ Secretion Optimization Kit는 PichiaPink™ Expression Strain Set와 함께 제공됩니다. 이 세트에는 PichiaPink™ 발현 시스템에 사용하는 4가지 Pichia pastoris strain이 들어있습니다. 이 4가지 모두 ade2 유전형을 갖습니다. 또한 이 중 3가지에는 protease 유전자 knockout이 포함됩니다. Protease 결핍 strain은 세포 성장 시 protease 억제제가 필요하지 않으며 단백질 수율을 높입니다. 단일 또는 이중 protease knockout을 시험해 어느 것이 여러분에게 적합한지 판단하세요.

PichiaPink™ Expression Strain Set (Cat. No. A11154)를 별도로 주문하여 PichiaPink™ Secretion Optimization Kit를 채울 수 있습니다.

시작하기 위한 배지 파우치
PichiaPink™ Media Kit는 PichiaPink™ Secretion Optimization Kit에 사용하는 편리한 사전 포장 배지 파우치입니다. PichiaPink™ Media Kit에는 동결 물질부터 transformation 및 선정 준비를 마친 배양액까지 PichiaPink™ strain을 성장시키는데 필요한 배지가 들어있습니다. PichiaPink™ Media Kit (Cat. No. A11156)를 별도로 주문해 PichiaPink™ Secretion Optimization Kit를 채울 수 있습니다.

왜 PichiaPink™ Yeast Expression System를 선택하는가?
PichiaPink™ Yeast Expression System은 효모 Pichia pastoris를 기초로 합니다. Pichia pastoris의 장점은 빠른 성장, 잘 정의된 유전적 배경, 간단한 배지 formulation, 손쉬운 취급 등입니다. Pichia pastoris는 30년 이상 전세계의 실험실에서 인간을 비롯한 여러 종의 수 백가지 단백질을 생산하는데 사용되고 있습니다(Ref 1, 2). PichiaPink™ Yeast Expression System은 소규모에서 대규모까지 편리하고 비용 대비 효과적으로 단백질을 생산할 수 있게 합니다.

PichiaPink™Yeast Expression System에 대한 상용 라이선스 획득정보는 outlicensing@lifetech.com에 문의하세요.

이 제품은 연구용으로만 사용가능합니다. 동물이나 사람의 치료 또는 진단 목적으로 사용할 수 없습니다.

관련 링크
• PichiaPink™ Yeast Expression System에 대해 더 알아보기.
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참고문헌

1. Cereghino JL, Cregg JM. Heterologous protein expression in the methylotrophic yeast Pichia pastoris. FEMS Microbiol Rev. 2000 Jan;24(1):45-66. [PubMed]
2. Cereghino GP, Cereghino JL, Ilgen C, Cregg JM. Production of recombinant proteins in fermenter cultures of the yeast Pichia pastoris. Curr Opin Biotechnol. 2002 Aug;13(4):329-32. [PubMed]