GeneArt™ Site-Directed Mutagenesis System은 표적 구조에서
in vitro로 3시간 내에 돌연변이를 생성하는 간편하고 편리하며 효율 높은 첨단 방법을 제공합니다. 이 시스템은 인기품인 GeneTailor™ Site-Directed Mutagenesis System을 대체하며 완전히 재설계된 것으로 현재 시판되는 site-directed 돌연변이 생성 제품입니다. 이 제품은 본사의 돌연변이유발 기술을 한단계 더 끌어올립니다.
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강력합니다. – 최대 14 Kb의 플라스미드에서 최대 12개 nucleotide를 대체, 제거, 삽입합니다.
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효율적입니다. – 원하는 돌연변이체를 한 번에 만들 수 있습니다. 3 Kb 플라스미드에서 90% 이상의 정확성을 가집니다.
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신속합니다. – 작업이 최소화된 간편한 프로토콜로 3시간 내에 플라스미드 DNA를 변이시킬 수 있습니다.
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활용도가 높습니다. – 플라스미드 크기나 DNA 원천에 상관없이 사용 가능하며 특별한 벡터나 숙주 균주, 제한 영역이 필요하지 않습니다.
원하는 돌연변이체를 간편하게 생성합니다.GeneArt™ Site-Directed Mutagenesis System은 DNA methylase의 내재적 속성과 high fidelity DNA polymerase, 재조합 효소,
E. coli의 천연
McrBC endonuclease에 의존하여 돌연변이를 생성합니다. 간단히 원하는 돌연변이(최대 12개 nucleotides)를 프라이머에 넣고 PCR, 재조합, transformation을 하면 의도한 돌연변이만 가진 벡터를 구할 수 있습니다(최대 90% 효율). 돌연변이를 추가하는 template vector는 어느 원천에서든 분리할 수 있습니다(최대 14Kb). 완전한 구조를 생성하거나 큰 조각의 비관련 DNA를 조합하려면
GeneArt™ Seamless Cloning and Assembly Kit (cat# A13288) 또는
GeneArt™ High-Order Genetic Assembly System (cat#A13286)를 찾아보세요.
최적화된 돌연변이유발 프로토콜GeneArt™ Site-Directed Mutagenesis System은 효율적이고 간편하게 최적화되어 있습니다. DNA 메틸화와 증폭 단계가 단일 반응으로 통합되어
in vitro DpnI digestion 단계가 필요하지 않습니다. 메틸화 및 증폭 후 증폭된 PCR 산물의
in vitro 재조합 반응 10분으로 콜로니 회수가 3∼10배 많아지며 mutagenesis efficiency이 높아집니다. 변이된 DNA를 DH5α™
E.coli cell로 최종 tranformation하면 모든 methylated parental DNA를 제거해 무결한 unmethylated mutagenesis 반응 산물만 남게됩니다. 정제 단계나 추가 digestion이 필요하지 않습니다. 다음 날 개별 콜로니를 선택해 돌연변이를 확인합니다.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.