Ambion™ TURBO™ DNase는 double-stranded DNA를 비특이적으로 절단하여 5' phosphorylated oligodeoxynucleotides를 만듭니다. 이는 DNA-결합 친화력을 높이며 염이 있는 상태에서 활성을 유지합니다. 이는 1,000 U (2 U/ μL)가 담긴 하나의 tube로 제공됩니다.

Ambion™ TURBO™ DNase 의 특징:

• 50x 이상의 활성, 350% 이상의 촉매 효율
• 최대 0.25 M 염을 함유한 용액에서 DNA를 효율적으로 분해
• DNA를 효율적으로 흡수하여 oligonucleotide 형성
• in vitro transcription 반응에서 DNA template의 우수한 제거
• RNase 무함유, 재조합체

DNase I는 RT-PCR 전에 RNA 샘플에서 DNA 오염을 제거하는 데 흔히 사용됩니다. 기존 DNase I은 DNA 친화력이 낮고 매우 비효율적으로 낮은 농도의 DNA를 절단합니다. 또한 DNase I는 염에 매우 민감하여 20 mM의 낮은 농도 NaCl가 효소 활성을 30%까지 낮출 수 있습니다. 마지막으로 DNase I는 RNase A가 많이 함유된 천연 자원 중 하나인 소 췌장에서 정제됩니다. DNase I 제조에서 RNase 활성 오염 위험이 있어 효소를 확실히 정제해야 합니다. 이런 한계에도 불구하고 현재 연구자들이 사용하는 DNase I는 반세기 이상 전에 Kunitz가 처음으로 분석한 효소와 매우 동일합니다.

야생형 DNase I 보다 우수한 속성을 갖는 다른 DNase
TURBO™ DNasesms는 야생형 DNase I의 DNA 결합 포켓에 아미노산 변화를 도입하는 단백질 조작법으로 개발되었습니다. 이런 변화는 DNA에 대한 단백질의 친화력을 크게 높입니다. 그 결과 DNA 농도가 나노미터(nM) 범위인 경우에도 DNA에 대해 6배 낮은 K_m을 가지며 200 mM 1가염 용액에서 50% 이상의 피크 활성을 유지하는 다용도 효소가 나타났습니다. in vitro transcription 반응을 DNase I 또는 TURBO™ DNase로 처리하면 TURBO™ DNase가 야생형 효소보다 input plasmid DNA template를 63배 더 제거합니다. TURBO™ DNase가 매우 낮은 농도의 DNA와 결합하는 능력은 이 효소가 미량의 DNA 오염을 제거하는데 특히 효과적이라는 의미입니다. 절단가능한 DNA 기질이 DNase 반응 진행에 따라 감소하기 때문에 이는 샘플에서 DNA를 완전히 제거하기 위해 중요해지고 있습니다. 따라서 TURBO™ DNase는 DNA에 대한 우수한 친화성으로 wild-type DNase보다 기능적인 장점을 갖습니다. 이는 DNA copy 수가 적어 PCR로 위양성 결과가 나올 수 있는 경우에도, RT-PCR 어플리케이션에서 잘 이용될 수 있습니다.

악세서리:
TURBO™ DNase는 5,000 U (AM2239)로도 이용할 수 있습니다. 또한 TURBO DNA-free™ (AM1907)도 이용가능합니다. 여기에는 TURBO™ DNase 외에도 흡수 후 샘플에서 효소를 비활성화하고 2가 양이온을 제거하는 시약이 제공됩니다.