PureLink™ HiPure Filter Plasmid Kit는 박테리아 배양액 25∼500 ml에서 높은 순도로 plasmid DNA를 분리하도록 만들어졌습니다(표 1). PureLink™ HiPure Plasmid Filter Kit에는 HiPure Filter Column이 있어 박테리아 용해물 정제 여과와 plasmid DNA 음이온 교환 수지 정제를 한 장치에 통합합니다. 이렇게 나온 plasmid DNA는 가장 확실한 DNA 정제법인 cesium chloride gradient를 2번 통과시킨 정제와 품질이 동일합니다. Transfection과 기타 어플리케이션에 사용할 수 있는 우수한 품질의 DNA를 2시간 내에 RNA, 단백질, endotoxin 등의 오염물에 대한 별도 제거 단계 없이 정제할 수 있습니다. 또한, 프로토콜에 phenol, chloroform, ethidium bromide, cesium chloride가 없어 유해 물질에 노출되고 유해 물질을 처리해야 할 위험이 최소화됩니다.

PureLink™ HiPure Plasmid Filter Kit의 특징:
• 간편한 프로토콜 - 원심분리 없이 박테리아 용해물 정제
• 빠른 결과 확보 - 2시간 내에 plasmid DNA 정제
• 높은 수율 - midiprep의 경우 최대 200 μg, maxiprep의 경우 최대 850 μg(표 1)
• 믿을 수 있는 성능 - 이 kit로 정제된 우수한 품질의 plasmid DNA는 다양한 어플리케이션에 적합합니다.

작동 방식

HiPure Filter Column을 PureLink™ HiPure Plasmid Kit에 추가해 원심분리할 필요없이 박테리아 용해물을 신속하게 제거할 수 있습니다(그림 1). 용해물 여과 카트리지가 DNA 결합 컬럼에 통합되어 있어 용해물 정제와 plasmid DNA 결합 단계가 음이온 교환 수지에서 직접 이루어집니다. 단일 컬럼 세척으로 RNA, 단백질, 대사산물, 기타 저분자량 분자 등의 불순물이 제거되고 고염 버퍼에서 초순수 plasmid DNA가 용출됩니다. 이 DNA를 탈염하여 isopropanol 침전으로 농축한 후 원심분리로 회수합니다. 전체 프로토콜을 약 2시간 내에 완료할 수 있습니다.