TOPO™ TA Cloning™ Kits for Sequencing은 염기서열분석을 위해
Taq polymerase 증폭 PCR 산물을 plasmid 벡터로 직접 삽입하는 효율성 높은 5분 원스텝 클로닝 전략('TOPO™ Cloning')을 제공합니다. 각 키트는 각 반응에서 회수되는 삽입 염기서열을 늘리고 벡터 염기서열을 줄이도록 특별히 설계된 염기서열부석 primer 부위가 있는 pCR™4-TOPO™ TA 벡터를 사용합니다. 이들 키트에는 선택한 PCR 분절을 가진 재조합 벡터 클로닝과 선택에 필요한 모든 것이 들어있습니다.
- 더 많은 염기서열 획득—표준 염기서열분석 primer를 사용할 때보다 삽입 염기서열이 많고 벡터 염기서열이 적습니다.
- 빠르고 쉬움—PCR에서 클로닝까지 단 3단계로 이루어지며 작업 시간이 5분 이내입니다.
- 효율적—올바른 삽입으로 최대 95%의 클론을 얻습니다
- 입증된 성능—십여년 동안 4000건 이상 인용된 믿을 수 있는 성능을 제공합니다.
TOPO™ TA Cloning™ Kits 염기서열분석 키트 개요 - 벡터: pCR™4-TOPO™ TA Vector
— 염기서열분석 결과 개선을 위해 최적화된 클로닝 벡터
- 클로닝 방법: TOPO™ TA 클로닝
— Topoisomerase I 기반, 5분 이내에 3´A overhangs (Taq-증폭)이 있는 PCR 산물을 벡터에 결합
- COMPETENT CELLS: 다양한 옵션
— 일반적인 고효율 박테리오파지 T1-내성 세포 또는 fast-growing competent 세포로 키트 선택
pCR™4-TOPO™ TA Vector—
염기서열분석에 최적화pCR™4-TOPO™ TA 벡터에서 여러 다중 클로닝 부위를 제거하여 염기서열분석 primer 부위와 삽입 부위 간 거리를 33 bp까지 줄였습니다. 이는 염기서열분석 반응으로 벡터 서열 감소와 삽입 염기서열이 많아짐을 의미합니다. pCR™4-TOPO™ TA 벡터는 다음과 같은 4가지 공통 염기서열분석 primer 부위를 가지고 있습니다: M13 forward, M13 reverse, T7, T3. 키트마다 각 aliquot가 들어있습니다.
pCR™4-TOPO™ TA Clone 선택 및 조작pCR™4-TOPO™ TA 벡터에는 ampicillin 및 kanamycin 내성 표지자와
LacZα-ccdB 유전자 융합이 들어있어 양성 선택 및 청색⁄백색 스크리닝이 가능합니다. 이 벡터는 다중 클로닝 부위가 최소화되어 있지만 여전히 클로닝된 PCR 산물의 간편한 절단을 위한 flanking EcoRI 부위와 염기서열분석 전 nested 결실 세대에 대한 고유한 Sse8387I 부위를 가지고 있습니다.
in vitro transcription을 위해 T7 및 T3 promoter도 존재합니다.
편한 TOPO™-기반 클로닝TOPO™ 클로닝 기술을 사용하여 특정 염기서열을 포함한 PCR primer, PCR 후 절차, 벡터 준비 또는 기타 시간이 허비되는 DNA 조작 단계가 필요하지 않습니다. PCR 반응을 곧바로 제공된 topoisomerase charged vector에 추가하여 5분 간 배양시킨 후
E. coli competent cells로 transform합니다.
효율적인 클로닝원하는 insert를 가진 클론의 최대 95%까지 스크리닝하는 클론을 줄여 시간과 비용을 절약할 수 있습니다. 이 키트에 사용되는 pCR™2.1-TOPO™ TA 벡터는 3´A overhangs을 가진
Taq 증폭 PCR 산물의 효과적인 결합을 위해 3´T overhangs와 함께 제공됩니다.
클로닝 표준클로닝의 경우, TOPO™ 클로닝 기술이 10년 이상 수 천명의 과학자들의 믿음직한 파트너가 되고 있습니다. 빠르고 사용하기 간편한 효율적인 TOPO™ 클로닝이 다양한 어플리케이션의 여러 다른 벡터에 적용됩니다.
TOPO™ TA Cloning™ Kits for Sequencing Kit 옵션TOPO™ TA Cloning™ Kits for Sequencing은 여러분의 필요에 따라 다양한 competent cells와 함께 구매할 수 있습니다.
- 일반 클로닝: TOP10 (Cat. No. K4575-J10, K4575-01, K4575-40)
- 고효율 클로닝: TOP10 Electrocomp™ Cells (Cat. No. K4580-01, K4580-40)
- 일반 클로닝 박테리오파지 T1 내성: DH5α-T1R (Cat. No. K4595-01, K4595-40)
- 빠른 성장: Mach1™-T1R Chemically Competent E. Coli (Cat. No. K4530-20)
염기서열분석을 바로 실시할 수 있는 깨끗한 재조합 plasmid 분리에 사용할 수 있는 PureLink™ Quick Plasmid Miniprep Kit (Cat. No. K4575-02)가 포함된 키트 버전도 제공합니다.
TOPO™ 제품은 연구용으로만 사용할 수 있습니다. 치료 또는 진단 목적으로 동물이나 사람에게 사용할 수 없습니다.
관련 링크 For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.