El reactivo de aislamiento/detección de exosomas humanos CD63 permite la purificación de exosomas CD63+ (también llamados vesículas extracelulares y cuerpos multivesiculares) a partir de muestras de cultivo celular preenriquecidas. Estos exosomas pueden ser detectados usando técnicas como citometría de flujo, microscopia electrónica o Western blotting. Los exosomas deben enriquecerse antes del aislamiento. Esto se puede hacer mediante ultracentrifugación o mediante el uso del reactivo de aislamiento de exosomas totales (a partir de medios de cultivo celular).

• Obtenga exosomas CD63+ altamente puros
• Vea su muestra durante la manipulación
• Protocolo fácilmente ampliable
• Detecte exosomas a través de citometría de flujo, en menos de 1 hora

El aislamiento y la detección de exosomas ha sido un proceso tedioso, inespecífico y difícil. El aislamiento/detección de exosomas humanos CD63 (a partir de medios de cultivo celular) utiliza la conocida tecnología de separación magnética Dynabeads™, lo que le permite purificar fácilmente exosomas CD63+ enriquecidos previamente de medios de cultivo celular y, a continuación, detectar los exosomas purificados mediante técnicas como citometría de flujo, microscopia electrónica o Western blotting.

Detección por citometría de flujo
Debido a que los exosomas libres solos son demasiado pequeños para ser detectados por citometría de flujo, una de las principales ventajas de emplear la tecnología de separación magnética es que los exosomas purificados y unidos a gránulos pueden visualizarse fácilmente mediante citometría de flujo. Los gránulos Dynabeads™ monodispersos y relativamente grandes (4,5 µm de diámetro) permiten realizar una detección de la dispersión frontal (FSC) y de la dispersión lateral (SSC) clara y definida normalmente en menos de 1 hora.

Vea su muestra
Los gránulos Dynabeads™ superparamagnéticos no solo se conocen por su sensibilidad, reproducibilidad y estabilidad, sino que la manipulación magnética también le permite ver su muestra debido al color marrón claro de los gránulos. Cuando se coloca un tubo de muestra en el imán, los exosomas unidos a gránulos son arrastrados hacia un lado del tubo, lo que permite llevar a cabo tareas de separación y purificación sencillas. Además, el volumen de la muestra y de los gránulos se puede ampliar o reducir fácilmente en función del tamaño de la muestra o de las aplicaciones secuencia abajo.

Una buena mezcla es fundamental
Para un correcto aislamiento de exosomas, es importante usar un mezclador que se incline y gire para asegurar que los gránulos no se depositen en el tubo. Evite la rotación de extremo a extremo para volúmenes de muestra pequeños (por ejemplo, 100 µl). Consulte el manual de usuario a continuación para obtener más instrucciones.