El reactivo EZ-Link Thermo Scientific NHS-LC-biotina es un reactivo de biotinilación activado por éster de NHS más sencillo para el etiquetado de aminas primarias (p. ej., lisinas de proteínas) que, gracias a la permeabilidad de su membrana, puede usarse para el etiquetado intracelular general.

Características de EZ-Link NHS-Biotin:

• Etiquetado de proteínas: biotinile anticuerpos u otras proteínas para la detección o purificación mediante resinas o sondas de estreptavidina.
• Penetra en la membrana: se puede utilizar para etiquetar el interior de las células (intracelular).
• Aminorreactivo: reacciona con aminas primarias (-NH2), como la cadena lateral de los lisinos (K) o los extremos de aminas de los polipéptidos.
• Irreversible: forma enlaces de amida permanentes; el brazo espaciador no se puede escindir.
• Solubilidad:debe disolverse en DMSO o DMF antes de su posterior dilución en tampones acuosos.
• Longitud corta: la longitud del brazo espaciador es de 13,5 angstroms (longitud total añadida al elemento diana); se compone de un grupo de ácido valérico de la biotina natural.

La NHS-biotina está formada por N-hidroxisucciminidobiotina. Es el más corto de tres reactivos similares EZ-Link NHS-Biotin que permiten la biotinilación simple y eficaz de anticuerpos, proteínas y cualquier otra biomolécula primaria que contenga aminas en solución. Los tres reactivos de éster de NHS, que solo se diferencian en la longitud del brazo espaciador, permiten a los investigadores optimizar los experimentos de etiquetado y detección en los que el impedimento estérico de la unión de biotina es un factor importante. Debido a que no están cargados y contienen brazos espaciadores de cadena alquilo sencillos, estos compuestos de biotina penetran en la membrana y son útiles para el etiquetado intracelular.

Fabricamos reactivos de biotina para garantizar la máxima integridad, coherencia y rendimiento global posible del producto en las aplicaciones de investigación previstas.

Los ésteres N-hidroxisulfosuccinimida (NHS) de la biotina son el tipo de reactivo de biotinilación que más se utiliza. Las biotinas activadas por NHS reaccionan eficazmente con grupos amino primarios (-NH2) en tampones alcalinos para formar enlaces amida estables. Las proteínas (como los anticuerpos) suelen tener varias aminas primarias que están disponibles como objetivos de etiquetado, incluyendo la cadena lateral de residuos de lisina (K) y el extremo N de cada polipéptido.

Las variedades de reactivos de éster de NHS de biotina difieren en longitud, solubilidad, permeabilidad celular y capacidad de escisión. Las biotinas de NHS no sulfonadas permean las células, pero deben disolverse en disolvente orgánico, como DMSO o DMF. Las biotinas de sulfo-NHS (y aquellas con separadores pegilados) son solubles en agua directamente, pero no permean las membranas. Las variedades que contienen enlaces disulfuro se pueden escindir mediante agentes reductores, lo que permite desconectar el grupo de biotina de la proteína etiquetada.