El kit Thermo Scientific EZ-Link de biotinilación NHS-PEG4 contiene biotina NHS-PEG4 EZ-Link y todos los reactivos adicionales necesarios para 8 reacciones de etiquetado de proteínas de 0,05–0,2 mg. La biotina NHS-PEG4 EZ-Link es un reactivo pegilado soluble en agua que sirve para un etiquetado de biotina simple y eficaz de anticuerpos, proteínas y otras macromoléculas primarias que contienen aminas.

Características de la biotina NHS-PEG4 EZ-Link:

• Etiquetado de proteínas: biotinile anticuerpos u otras proteínas para la detección o purificación mediante resinas o sondas de estreptavidina.
• Aminorreactivo: reacciona con aminas primarias (-NH2), como la cadena lateral de los lisinos (K) o los extremos de aminas de los polipéptidos.
• Pegilado: el brazo espaciador contiene un grupo de polietilenglicol (PEG) hidrófilo, de cuatro unidades.
• Mejora la solubilidad: la pegilación proporciona solubilidad en agua a la molécula biotinilada, lo que ayuda a evitar la acumulación de anticuerpos biotinilados almacenados en la solución.
• Irreversible: forma enlaces de amida permanentes; el brazo espaciador no se puede escindir.
• Largo alcance: la longitud del brazo espaciador es de 29 angstroms (longitud total añadida al elemento diana); esto reduce el impedimento estérico al unirse a las moléculas de avidina.

La biotina NHS-PEG4 es un reactivo de biotinilación de éster de NHS largo (29,0 Å), pegilado y soluble en agua ideal para marcar aminas y maximizar la solubilidad de anticuerpos y otras proteínas. El grupo de éster de N-hidroxisuccinimida (NHS) reacciona de forma específica y eficaz con los grupos amino lisina y N-terminal para formar enlaces de amida estables. El agente separador de polietilenglicol hidrófilo (PEG) imparte solubilidad en agua que se transfiere a la molécula biotinilada, reduciendo así la agregación de proteínas etiquetadas almacenadas en la solución. El agente separador PEG también proporciona al reactivo una conexión larga y flexible para minimizar el obstáculo estérico en la unión a las moléculas de avidina.

Fabricamos reactivos de biotina para garantizar la máxima integridad, consistencia y rendimiento global posible del producto para las aplicaciones de investigación previstas.

Los ésteres de N-hidroxisulfosuccinimida (NHS) de biotina son el tipo más popular de reactivo de biotinilación. Las biotinas activadas por NHS reaccionan eficazmente con grupos amino primarios (-NH2) en tampones alcalinos para formar enlaces amida estables. Las proteínas (como los anticuerpos) suelen tener varias aminas primarias que están disponibles como objetivos de etiquetado, incluyendo la cadena lateral de residuos de lisina (K) y el extremo N de cada polipéptido.

Las variedades de reactivos de éster de NHS de biotina difieren en longitud, solubilidad, permeabilidad celular y capacidad de escisión. Las biotinas de NHS no sulfonadas permean las células, pero deben disolverse en disolvente orgánico, como DMSO o DMF. Las biotinas de sulfo-NHS (y aquellas con separadores pegilados) son solubles en agua directamente, pero no permean las membranas. Las variedades que contienen enlaces disulfuro se pueden escindir mediante agentes reductores, lo que permite desconectar el grupo de biotina de la proteína etiquetada.

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