El kit de ChIP en agarosa Thermo Scientific Pierce ofrece un completo conjunto de reactivos y un protocolo sencillo, rápido y reproducible para realizar ensayos de inmunoprecipitación de cromatina (ChIP).

Características del kit de ChIP en agarosa:

• Protocolo de ensayo de CHiP simple y rápido (< 8 horas)
• Alta eficiencia en el aislamiento y la lisis de núcleos
• Digestión enzimática fácil y reproducible
• Bajo fondo y alta capacidad de unión proteína A/G resina de agarosa
• Controles positivos altamente específicos incluidos: Anticuerpo de ARN polimerasa II y primers de PCR para GAPDH
• Formato de columna de centrifugación rápido y reproducible
• Purificación de ADN de alta recuperación
• Anticuerpos disponibles validados por ChIP

El kit de ChIP en agarosa Pierce contiene suficientes reactivos para realizar 30 ensayos de ChIP con controles adecuados, mediante un protocolo optimizado y un práctico formato de columna de centrifugación. También se dispone de anticuerpos validados por ChIP y de calidad garantizada para su uso con el kit de ChIP en agarosa Pierce. Debido a que los anticuerpos que trabajan para el Western blot pueden no funcionar en ensayos de ChIP, hemos reunido nuestros anticuerpos monoclonales y policlonales validados por ChIP más populares aquí para ayudarle a pasar de la configuración experimental a los resultados más rápidamente.

La fuerza del ensayo de ChIP es su capacidad de capturar una instantánea de las interacciones específicas de proteína-ADN a medida que se producen en las células vivas, y luego cuantificar las interacciones mediante PCR estándar o cuantitativa. Los ensayos de ChIP satisfactorios requieren la realización de una serie de pasos clave (entrecruzado, preparación de la cromatina e inmunoprecipitación) antes de detectar la secuencia de ADN genómico diana. A nivel individual, la optimización de cada paso del protocolo de ensayo de ChIP puede ser laboriosa. El kit de ensayo de ChIP en agarosa Pierce simplifica el proceso, facilitando la obtención de resultados exactos y reproducibles.

Para realizar ensayos de ChIP con el kit de ChIP en agarosa Pierce, se estabilizan complejos proteína-ADN, y luego se extraen. El entrecruzamiento in vivo se logra tradicionalmente con formaldehído. El entrecruzamiento realizado directamente en las células encierra los complejos proteína-ADN, atrapando estas interacciones inestables y a veces transitorias. Para lisar, extraer y solubilizar los complejos entrecruzados, el kit de ensayo de ChIP incluye el módulo de preparación de cromatina Thermo Scientific (también se vende por separado con la referencia 26158). En conjunto, este completo kit de ensayo de ChIP proporciona un medio sencillo, fiable y cómodo para aislar ADN ligado a la cromatina y enriquecer muestras para las proteínas de interés con menos del 15 % de contaminación de otros compartimentos celulares, sin un homogeneizador Dounce.

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