El reactivo de extracción de proteínas de levadura Thermo Scientific Y-PER es el primer reactivo de lisis de levadura disponible en el mercado que utiliza un procedimiento de lisis con detergente suave para liberar de forma eficaz las proteínas solubilizadas funcionalmente activas.

Características del reactivo de extracción de proteínas de levaduras Y-PER:

• Más proteínas: extrae dos veces más proteínas que los métodos a base de gránulos de vidrio.
• Menos tedioso: elimina las dificultades asociadas con la lisis por gránulos de vidrio tradicional (por ejemplo, agrupamiento de gránulos con carga estática, acumulación de gránulos/proteínas y fuga de gránulos).
• Optimizado para proteínas: validado para su uso con Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces pombe y Pichia pastoris.
• Versátil: eficaz para muchos organismos diferentes, incluidas la Bacillus subtilus, las bacterias grampositivas y las gramnegativas, y adecuado para su uso en una amplia variedad de situaciones.

Este tampón de lisis celular basado en detergente elimina la necesidad de utilizar gránulos de vidrio o tratamientos mecánicos que impliquen agentes reductores fuertes, productos químicos o pH y temperaturas extremos para alterar el envoltorio celular de espesor proteico, algo necesario para la extracción de proteínas. El conocido protocolo de lisis con gránulos de vidrio requiere equipos especiales y debe realizarse a una temperatura de 4°C. Los bajos rendimientos de proteínas obtenidos normalmente con esta técnica son el resultado de la desnaturalización de las proteínas y de la unión no específica a los gránulos de vidrio. El reactivo Y-PER utiliza un sencillo protocolo a temperatura ambiente que pueden completarse en 20 minutos y que no requiere equipo especial alguno.

El protocolo estándar para la extracción de proteínas que ofrece el reactivo Y-PER es fácil: se añade el volumen de reactivo Y-PER apropiado para sedimentar las células de levadura, se incuba a temperatura ambiente durante unos 20 minutos y se centrifuga para eliminar los residuos. El sobrenadante resultante es una solución concentrada de proteínas que supera los resultados que suelen obtenerse con la interrupción con gránulos de vidrio tradicional.

La naturaleza unicelular de la levadura, combinada con su capacidad para realizar modificaciones postransduccionales que imitan procesos en eucariotas superiores, ha hecho de la levadura una herramienta de investigación muy importante. Los muchos vectores disponibles, así como el desarrollo de sistemas de expresión recombinantes, confieren a la levadura un papel insustituible en el sector de la investigación. El reactivo Y-PER es eficaz para proteínas S. cerevisiae y otras especies conocidas, y puede utilizarse en la purificación de proteínas marcadas para fusión y en ensayos de enzimas reporteros con estos organismos modelo. Este reactivo de lisis se puede utilizar también para la extracción de ADN plásmido y genómico de levadura.

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