Ion AmpliSeq™ Cancer Hotspot Panel v2
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Ion AmpliSeq™ Cancer Hotspot Panel v2

Das Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot Panel v2 ist ein Einzelpool mit Primern zur Durchführung von Multiplex-PCR zur Vorbereitung von Amplicon-Bibliotheken ausWeitere Informationen
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Das Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot Panel v2 ist ein Einzelpool mit Primern zur Durchführung von Multiplex-PCR zur Vorbereitung von Amplicon-Bibliotheken aus genomischen „Hot Spot“-Regionen, die in menschlichen Krebsgenen häufig mutiert sind (Herunterladen der Liste von Zielgenen und Mutationen für das Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot Panel v2). Das neueste gebrauchsfertige Ion AmpliSeq™Panel baut auf den in unserem ursprünglichen Ion AmpliSeq™Cancer Panel enthaltenen Mutationen auf und bietet:
• Die Kompatibilität mit FFPE-Proben wurde beibehalten, während der Mutationsinhalt für eine breitere Abdeckung zusätzlicher Gene und Hotspot-Mutationen erweitert wurde.
• Extrem einheitliche Abdeckung für effizientere Sequenzierung und Kosteneinsparungen
• Verbessertes Primer-Design mit Optimierung neuer Primer-Sets und noch geringerer Strangvorspannung für mehr Vertrauen in präzise Variantenabrufe
• Verbesserte Variantendetektion mit Torrent Suite Software v3.0 und Variant Caller Plugin bei der Detektion von Varianten mit geringen Allelen zusammen mit verbesserter Indel-Empfindlichkeit

Zusätzlicher Mutationsinhalt für Advancing Cancer Research Studies
Das Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot Panel v2 wurde entwickelt, um 207 Amplicons zu verstärken, die etwa 2.800 COSMIC-Mutationen von 50 Onkogenen und Tumorsuppressorgenen abdecken. Dazu gehören die 739 COSMIC-Mutationen von 46 Genen im ersten Ion AmpliSeq™ Cancer Panel in Verbindung mit zusätzlichen Hotspot-Mutationen signifikanter Krebsgene. Unter Beibehaltung der Kompatibilität mit FFPE-Proben und Einbeziehung der gleichen Ziele wie der des ersten Ion AmpliSeq™ Cancer Panel haben wir durch Hinzufügen mehrerer Amplicone für Hotspots in EZH2, GNA11, GNAQ und IDH2, sowie durch Zugabe von etwas längeren Ampliconen, zusätzliche Mutationen hinzugefügt, um Ihre Krebsforschung voranzubringen. Das Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot Panel v2 sollte mit dem Ion AmpliSeq™Library Kit 2.0verwendet werden.

Effizientere und kostengünstigere Sequenzierung mit extrem gleichmäßiger Abdeckung
Das verbesserte Primer-Design im Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot Panel v2 verbessert die Homogenität der Abdeckung der Ion AmpliSeq™-Technologie. Mit einer gleichmäßigeren Einbeziehung wird bei viel weniger Sequenzierungsdurchsatz eine minimale Tiefe über alle Amplicone hinweg erzielt. Daher können zusätzliche Proben mit beliebigen Ion-Chips multiplexiert werden. Dies führt durch effizientere Sequenzierung bei gleichzeitiger Beibehaltung einer hohen Zuverlässigkeit beim Variant Call zu Kosteneinsparungen. Darüber hinaus bietet die geringe Strangvorspannung in den Primer-Sets des Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot Panel v2 ein weiteres Vertrauen in präzise Variantenaufrufe.

Einfachheit, Geschwindigkeit und Skalierbarkeit der Ion AmpliSeq™Technologie
Das™Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot Panel v2 ermöglicht krebsgenetische Untersuchungen aus FFPE-Gewebe mit nur 10 ng Input-DNA für eine gezielte Bibliothekserstellung. Das Ion AmpliSeq™ Cancer Hotspot Panel v2 hält darüber hinaus auch den revolutionären Arbeitsablauf mit Standard-PCR-Ausrüstung und einer einfachen PCR-Reaktion für die ultrahohe Multiplex-PCR-basierte Zielauswahl aufrecht, und es besteht keine Notwendigkeit für umfangreiche Investitionen. Darüber hinaus erzielen Sie mit dem Ion AmpliSeq™ Cancer Hotspot Panel v2 auch weiterhin die schnellste Erzeugung von Zielbibliotheken in ca. 3,5 Stunden. Skalierbarkeit und Flexibilität bleiben auch mit dem Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot Panel v2 erhalten, das die Möglichkeit bietet, eine Probe oder multiplexcodierte Proben mit einem der Ionenchips zu sequenzieren.

Verbesserte Variantenerkennung mit Torrent Suite-Software v3.0
Die intuitive Torrent Suite-Software und das Variant Caller Plugin ermöglichen es Ihnen, innerhalb von nur 10 Stunden von extrahierter DNA zu Variantenaufrufen zu gelangen. Mit verbesserten Algorithmen ist ein Indel-Nachweis mit höherer Empfindlichkeit verbunden, und es kann auch Einzelnukleotid-Polymorphismus (SNP) mit niedrigerer Allel-Häufigkeit empfindlicher nachgewiesen werden. Dann kann die Ion Reporter™ Software für die Annotation von Varianten in DNA-Routineassays für das Voranbringen der klinischen Forschung verwendet werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.

Specifications
Zur Verwendung mit (Anwendung)Sequenzierung
Zur Verwendung mit (Geräte)Ion PGM™ System
BibliothekenTargeted Sequencing Library
Multiplex-Funktion207 amplicons
Anzahl Reaktionen8
ProduktlinieIon AmpliSeq™
ProdukttypCancer Hotspot Panel
Menge8 Reactions
ProbentypBlut, Blut, Zellkulturen, Klinische Proben, DNA (genomisch), DNA from FFPE, dsDNA, Fine Needle Aspirates (FNA), FFPE, Whole Blood
SpeziesHuman
Ausgangsmaterialmenge10 ng DNA
VerfahrenAmplicon Sequencing, Post-Light™ Ion Semiconductor Sequencing
ArbeitsablaufschrittZielauswahl
Sequencing TypeGenom- und DNA-Sequenzierung
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
1 tube. Store at -30 to -10 °C
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Zertifikate

Chargen-Nr.Certificate TypeDateCatalog Number(s)
2407045Certificate of Analysis14. Aug. 20244475346
2211044Certificate of Analysis08. Dez. 20224475346
2201043Certificate of Analysis20. Apr. 20224475346
2008041Certificate of Analysis08. Apr. 20224475346
1905038Certificate of Analysis07. Apr. 20224475346
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Sicherheitsdatenblätter

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

A DNA fragment library is constructed from whole genomic DNA and is commonly used for whole genome resequencing or de novo sequencing. Briefly, the whole genomic DNA is fragmented or sheared, ligated with Ion-specific adapter sequences, and then size-selected for the library fragments of the desired length.

Amplicon libraries are constructed from PCR-amplified DNA fragments and are used for targeted sequencing (e.g., investigating variants at known genomic locations). There are two types of amplicon libraries, short and long.

A short amplicon library contains DNA fragments (targets) with lengths that are compatible with the Ion template preparation kits without any further shearing or fragmentation during library preparation. Additionally, no size-selection step is required, as the amplicons are already within the desired size range.

A long amplicon library contains DNA fragments (targets) with lengths that are longer than those compatible with the Ion template kits and requires further shearing or fragmentation during library preparation. The library preparation protocol for long amplicons is similar to fragment libraries.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Next-Generation Sequencing Support Center.

The Ion Library Equalizer Kit (Cat. No. 4482298) is recommended for use with Ion AmpliSeq libraries and provides an alternative to library quantification methods by using bead-based technology to normalize the final library concentration to ~100 pM.

The Ion Library Equalizer Kit is fast and cost-effective compared to traditional quantification methods; however, it may be not be the right choice for all users. Briefly, the library is amplified with the Ion Equalizer Primers, captured onto Equalizer Beads, and the normalized library is eluted from the beads using a specially formulated Equalizer Elution Buffer. The final library is normalized to ~100 pM, but there is no quality control information (e.g., measured concentration or size distribution) that can be obtained, which is possible if using the recommended library quantification kits: Ion Library Quantitation Kit (qPCR), Qubit dsDNA HS Assay Kit (Qubit 2.0 Fluorometer), or Agilent High Sensitivity DNA Kit (Agilent Bioanalyzer instrument).

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Detailed information regarding the variants targeted for each of the panels can be found at www.ampliseq.com. Under the Panels tab, find your panel of interest and press the “Download panel files” buttons. The ZIP archive will contain CSV files that include links to the COSMIC entries for each mutation on the cancer-related panels.

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If you've reviewed your design and are not satisfied with the results, please click on the “Not happy with this design? Let us help” link to have an Ion Ampliseq team member contact you about additional options for your design.

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Please visit the Ion AmpliSeq Designer website (www.ampliseq.com) and log in with your Thermofisher username and password. Select the “Help” tab to review training videos and documentation, including pipeline details, troubleshooting guides, and frequently asked questions.

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