La proteína NeutrAvidin Thermo Scientific™ es una forma de avidina especialmente preparada que disminuye el fondo de la unión a la biotina.
Sus características son:
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Punto isoeléctrico casi neutro: pI = 6,3, más neutro que la avidina nativa
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Casi desprovisto de glicosilación: disminuye la posibilidad de unión a lectina en comparación con la avidina nativa
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Sin secuencia de reconocimiento RYD: no se conocen dominios de enlace fuera del objetivo como la estreptavidina
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Asequible: precio significativamente inferior al de la estreptavidina
La proteína NeutrAvidin es avidina nativa desglicosilada de clara de huevo. La eliminación del exceso de carbohidratos mediante un proceso exclusivo produce una proteína con un punto isoeléctrico más neutral y menos propiedades de unión inespecífica. La proteína NeutrAvidin purificada proporcionan un rendimiento excepcional en aplicaciones de Western blot, ELISA e IHC que requieren sondas de unión a biotina. La especificidad del ensayo, la sensibilidad y las relaciones señal-ruido con la proteína NeutrAvidin suelen ser equivalentes o mejores que con la estreptavidina, que es significativamente más cara.
La avidina es una glicoproteína que se encuentra en la clara de huevo y tejidos de aves, reptiles y anfibios. La proteína de unión a biotina contiene cuatro subunidades idénticas, con una masa combinada de 67.000-68.000 daltons. Eliminar la glicosilación la avidina produce una proteína NeutrAvidin con una masa de 60.000 daltons. La unión a lectina basada en carbohidratos se reduce a niveles indetectables, sin embargo, se retiene la afinidad a la biotina. La proteína NeutrAvidin ofrece las ventajas de un pI neutro para minimizar la adsorción inespecífica, junto con residuos de lisina que quedan disponibles para la obtención de derivados u otra conjugación personalizada. La proteína NeutrAvidin produce la unión inespecífica más baja entre las proteínas de unión a biotina conocidas. La actividad específica de unión a biotina es de aproximadamente 14 μg/mg g/mg de proteína, que está cerca de la actividad máxima teórica.
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