FastDigest PdiI
FastDigest PdiI
Thermo Scientific™

FastDigest PdiI

5' G C C ↓G G C 3' 3' C G G ↑C C G 5' Das Thermo Scientific FastDigestWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
FD152450 μL (50 Reactions)
Katalognummer FD1524
Preis (EUR)
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5'  G  C  C ↓G  G  C   3' 
3'  C  G  G ↑C  C  G   5' 

Das Thermo Scientific FastDigest PdiI Restriktionsenzym erkennt die GCC^GGC-Stelle und schneidet am besten bei 37°C in 5 bis 15 Minuten mit FastDigest Universalpuffer. Isoschizomere: NaeI, MroNI, NaeI, NgoMIV.

Thermo Scientific FastDigest PdiI gehört zu einer modernen Produktlinie schneller Restriktionsenzyme, die alle zu 100 % im FastDigest Universalpuffer und FastDigest Green Reaktionspuffer aktiv sind.

Der Universalpuffer ermöglicht einen schnellen Einzel-, Doppel- oder Mehrfachverdau von DNA innerhalb von 5 bis 15 Minuten ohne erforderlichen Pufferwechsel oder anschließende DNA-Reinigungsschritte. Unter Reaktionsbedingungen für FastDigest-Enzyme finden Sie eine Tabelle mit Angaben zu Enzymaktivität, Hitzeinaktivierung und Inkubationszeiten für diese und andere FastDigest-Restriktionsenzyme. DNA-modifizierende Enzyme wie das Klenow-Fragment, T4 DNA-Ligase, alkalische Phosphatasen und T4 DNA-Polymerase besitzen alle im FastDigest-Puffer eine uneingeschränkte Aktivität. Aus diesem Grund können Enzyme für nachfolgende Anwendungen direkt dem FastDigest-Reaktionsgemisch hinzugefügt werden.

Als zusätzliche Erleichterung enthält FastDigest Green Buffer ein Dichtereagenz und zwei Tracking-Farbstoffe zum direkten Auftragen der verdauten Reaktionsprodukte auf ein Gel.

Kurze Inkubationszeiten und eine optimale Zusammensetzung des FastDigest-Universalpuffers verhindern das Auftreten von Star-Aktivitäts-Effekten.

Eigenschaften

• 100 % Aktivität aller FastDigest-Enzyme im Universalpuffer
• 100 % Pufferkompatibilität mit nachfolgenden Anwendungen
• vollständiger Verdau in 5 bis 15 Minuten
• direktes Auftragen auf Gele möglich
• keine Star-Aktivität
• 176 FastDigest-Enzyme erhältlich

Anwendungen

• molekulare Klonierung
• Kartierung von Restriktionsstellen
• Genotypisierung
• Southern Blot
• Restriktionsfragment-Längenpolymorphismus (RFLP)
• SNP-Analyse

Hinweis: Für die Spaltung mit FastDigest PdiI werden mindestens zwei Kopien seiner Erkennungssequenz benötigt. Bestimmte Stellen in pBR322 sind mit FastDigest PdiI schwierig zu spalten; das Gleiche gilt für den Prototyp Nael.

FastDigest Green Buffer bietet dieselbe hohe Leistung beim DNA-Verdau und im Downstream-Prozess wie der farblose FastDigest Puffer. Für Anwendungen, die eine Produktanalyse durch Fluoreszenzanregung erfordern (z. B. Konzentrationsmessungen in UV-Licht), wird der farblose FastDigest-Puffer empfohlen.

Angaben zur Methylierungssensitivität finden Sie in den Produktspezifikationen.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
Kompatibler Puffer10x FastDigest Puffer/FastDigest Green Puffer
Inactivation Temperature65°C
ÜberhangStumpf
ProdukttypRestriktionsenzym
Menge50 μL (50 Reactions)
EnzymPdiI
MethylierungsempfindlichkeitEmpfindlich für CpG-Methylierung, nicht empfindlich für Dam-Methylierung und Dcm-Methylierung, nicht empfindlich für Dam-Methylierung und Dcm-Methylierung, Not Dcm Methylation-Sensitive
Optimale Reaktionstemperatur37°C
ProduktlinieFastDigest
ForschungskategorieHerkömmliches Klonen
Empfindlich gegen HitzeinaktivierungJa
Typ IIS RENein
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
• FastDigest PdiI (50 μL)
• 10X FastDigest Buffer (1.0 mL)
• 10X FastDigest Green Buffer (1.0 mL)

Store at –20°C.

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Zertifikate

Chargen-Nr.Certificate TypeDateCatalog Number(s)
3274228Certificate of Analysis04. Juli 2025FD1524
3266907Certificate of Analysis23. Juni 2025FD1524
3243967Certificate of Analysis21. Mai 2025FD1524
3239109Certificate of Analysis14. Mai 2025FD1524
3233762Certificate of Analysis07. Mai 2025FD1524
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Sicherheitsdatenblätter

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

The FastDigest Buffers can be stored at 4 degrees C for at least 6 months. For long-term storage until their expiration, we recommend storing the FastDigest and FastDigest Green Buffers at -20 degrees C.

Our general recommendation is to use 5-10 µL of FastDigest enzymes with 100 µg DNA in 500 µL and 10-20 µL of the FastDigest enzymes with 200 µg DNA in 1 mL. Incubate the reaction for 16 h (or the longest recommended incubation time if the particular enzyme is prone to star activity) at the recommended temperature. Optimal conditions may vary as complete digestion of DNA depends on the nature of the particular FastDigest restriction enzymes and the DNA substrates.

The concentration of FastDigest enzymes is proprietary information. The FastDigest enzyme activity is measured by FastDigest unit (FDU): 1 µL of enzyme (1 FDU) cleaves 1 µg of DNA substrate in 5-15 min at 37 degrees C in 20 µL of 1X FastDigest buffer.

Yes, the FastDigest Buffer (Cat. No. B64) and the FastDigest Green Buffer (Cat. No. B71) can be purchased separately.

The FastDigest Green Buffer offers the same performance as the colorless FastDigest Buffer but enables direct loading of the reaction mixture on gels. The 10X FastDigest Green Buffer includes a density reagent and two tracking dyes for direct loading. The blue dye migrates with 3-5 kb DNA fragments in a 1% agarose gel and has an excitation peak of 424 nm. The yellow dye migrates faster than 10 bp DNA fragments in a 1% agarose gel and has an excitation peak of 615 nm.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Restriction Enzyme Cloning Support Center.

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