T7-RNA-Polymerase ist eine DNA-abhängige RNA-Polymerase, die eine hohe Spezifität für Bakteriophagen-T7-Promoter-Sequenzen aufweist. Synthetisiert große Mengen RNA aus DNA, die in einen Transkriptionsvektor hinter einem T7-Promoter eingefügt wird. Ein technisches Informationsblatt zur T7-RNA-Polymerase ist verfügbar.

Anwendung: Synthese von markierten und nicht markierten RNA-Transkripten (1).

Quelle: Aufgereinigt aus E. coli , mit Exprimierung des T7-RNA-Polymerase-Gens auf einem Plasmid.

Leistungs- und Qualitätskontrolle: 3´und 5´ Exodeoxyribonuklease-, Ribonuklease- und DNA-Nicking-Assays; Leistung bei einer
Transkriptionsreaktion.

Einheiten-Definition: Eine Einheit hydrolysiert in 1 h bei 37 °C mit einem T7-Transkriptionsvektor als Template 1 nmol Ribonukleotid in säurefällbares Material

Einheiten-Reaktionsbedingungen: 40 mM Tris-HCl (pH 8,0), 25 mM NaCl, 8 mM MgCl₂, 2 mM Spermidin-(HCl)₃, 5 mM DTT, 0,4 mM ATP, 0,4 mM CTP, 0,4 mM GTP,0,4 mM UTP, 1 µCi [³H]GTP, 1 µg Sph I-Cut pT7L13, und Enzym in 50 µl für 10 min bei 37 °C.