RT-PCR用のSuperScript™第一鎖合成システムは、精製ポリ（A）+ RNAまたはトータルRNAから第一鎖cDNAを合成する目的で最適化されています。このシステムは、わずか1 ngまたは最大5 µgのトータルRNAで、使用できます。合成後、有機質仲介抽出やエタノール沈殿を経ることなく、PCRによる特異的プライマーを用いてcDNAの増幅ができます。PCRと組み合わせてこのシステムを使用すると、希少メッセージの存在検出、少数の細胞から特定のmRNA量を定量、または全cDNAライブラリを構築することなく特定cDNAのクローニングを行うことができます。このシステムには柔軟性があり、あらゆるPCR酵素が使用可能です。より高い特異性のPCRにはAccuPrime™ Taq DNAポリメラーゼまたはPlatinum™ Taq DNAポリメラーゼを、高忠実クローニングのアプリケーションにはAccuPrime™ Pfx DNAポリメラーゼを組み合わせてください。

SuperScript II RT
第一鎖cDNA合成反応は、SuperScript™ II逆転写酵素（RT）によって触媒されます。この酵素は、第一鎖反応中にmRNAを分解するRNase H活性を低減するように設計されており、完全長cDNAの合成能力および第一鎖cDNAの収量が、RNase H+ RTの場合よりも高くなりますSuperScript™ II RTはリボソームRNAや転移RNAによって大きく阻害されないため、全RNA調製から効率的に第一鎖cDNAを合成する目的で使用できます。この酵素は熱安定性が向上しており、最高50℃までの温度で使用できます

RT-PCRにおけるSuperScript™第一鎖合成システムの使用
このシステムは、さまざまな量の出発物質から第一鎖cDNAを合成する目的で最適化されています。この最適化プロセスの一部として、SuperScript™ II RTの濃度を下げ、RNaseOUT™組換えRNase阻害剤を、システムに追加しています。さらに、システムの感度をさらに向上させるため、反応条件が変更されています。本キットを使用すると、第一鎖cDNAは、オリゴ（dT）、ランダムプライマーまたは遺伝子特異的プライマーでプライミングされたトータルRNA、あるいはポリ（A）+選択RNAのいずれかを使用して合成できます。次に、目的の遺伝子に特異的なプライマーを使用して、別のチューブでPCRを行います。