Pierce™ Firefly Luciferase Glow Assay Kit

Thermo Scientific Pierce Firefly Luciferase Glow Assay Kitは、タンパク質発現アッセイにおいて、ホタルルシフェラーゼレポーターの存在下で明るく安定した生物発光シグナル（半減期は2時間以上）を生成します。

Firefly Luciferase Glow Assay Kitの特長：

•高感度—ホタルルシフェラーゼ活性を高感度に検出；最良の結果（最大シグナル）を得るにはPierce Firefly Luciferase Signal Enhancerと併用
• 安定性—フラッシュアッセイより高いシグナル安定性
• シンプル—インジェクター搭載型ルミノメーターは不要
• 適合性—アッセイ試薬は他のホタルルシフェラーゼにも適合
• 自動化対応—ハイスループットアッセイに適合
• 便利—汎用の細胞溶解バッファーと最適化済みグローアッセイ試薬を同梱
• 安全—非放射性アッセイを実現

このPierce Luciferase Glow Assay Kitには、細胞ライセート中のホタルルシフェラーゼ活性を測定するための試薬が含まれます。グロー試薬は、ホタルルシフェラーゼの存在下で安定した生物発光シグナルを放出し、インジェクターを搭載しないルミノメーター、またはサンプルのバッチ処理に最適です。ルシフェラーゼ反応によって生成した発光は、産生されたルシフェラーゼタンパク質量と相関し、ルシフェラーゼ発現を誘導するプロモーターの活性とも比例します。グローアッセイ試薬は、Thermo Scientific Firefly Luc Plasmidsと併用することで最良の結果が得られるように最適化されていますが、このアッセイキットは、D-ルシフェリンを基質として使用する他のホタルルシフェラーゼまたはATP依存性ルシフェラーゼの活性検出にも使用できます。

内容：
細胞溶解バッファー、反応バッファー、および基質；ルシフェラーゼシグナルエンハンサーは別途購入。

必要なもの：
• ホタルルシフェラーゼ、およびルミノメーター、または発光モニタリングが可能な他の機器（Thermo Scientific Luminoskan AscentやVarioskan Flashマイクロプレートリーダーなど）。
•最良の結果（最大シグナル）を得るにはPierce Firefly Luciferase Signal Enhancerと併用。

アプリケーション：
• cis調節因子およびtrans作用因子を解析するためのプロモーター研究
• 薬物スクリーニング
• siRNAおよびmiRNAのスクリーニング
• オフターゲット効果を研究するマルチプレックスアッセイ
• タンパク質局在レポーターアッセイ
• シグナル伝達経路解析
• RNAスプライシング研究

ホタルルシフェラーゼは、ホタル科の甲虫（Photinus属やLuciola属など）の数種が天然に産生する60 kDaのタンパク質です。ホタルルシフェラーゼの生物発光シグナルは、D-ルシフェリンの酸化によるものです。ルシフェラーゼ反応によって生成された発光シグナルはルミノメーターで捕捉できます。この発光シグナルは、産生されたホタルルシフェラーゼタンパク質量と相関し、ホタル遺伝子発現を誘導するプロモーター活性の測定に用いることができます。天然ホタルルシフェラーゼシグナルは、強く発光して急速に減衰するシグナルを生成します。Pierce Firefly Glow Assay Kitを使用して生成されるシグナルはより安定で、非常にゆっくりと減衰するため、インジェクター搭載型ルミノメーターは不要です。